冯丹 刘婷 李冠汝 孙丽蕴

    环境污染导致大气臭氧层的破坏日益加剧，紫外线(ultraviolet radiation，UV)辐射水平增加。紫外线辐射，特别是紫外线B(ultraviolet-B，UVB)290～320 nm直接作用于HaCaT细胞，通过诱导氧化应激、炎症过程进而影响皮肤屏障功能，形成光损伤[1]。UVB辐射抑制HaCaT细胞内源性抗氧化剂超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性并增加氧化终产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的产生[2]，UVB诱导的细胞损伤会激活炎性细胞因子，并能够抑制细胞增殖和转化生长因子β(transforming growth facor-β,TGF-β)通路调控的胶原蛋白的表达[3-4]，这是导致HaCaT细胞光损伤的重要内容。中医药治疗光敏感性皮肤反应具有很好的疗效，应用前景广阔[5]。蒿秦化斑方在临床中应用治疗光敏感性皮肤病取得了较好的疗效，由青蒿、秦艽、丹皮、赤芍等组成，其改善光损伤的机制尚未明确。本实验通过建立UVB辐射诱导的HaCaT细胞光损伤体外模型，以蒿秦化斑方高、中、低剂量进行干预，观察蒿秦化斑方对于UVB诱导的HaCaT细胞光损伤的影响，探讨其可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 药物

    蒿秦化斑方汤剂，组方为青蒿30 g、生地黄15 g、水牛角15 g、秦艽10 g、牡丹皮15 g、赤芍15 g、防风15 g、生甘草6 g。由北京中医医院(供货方：北京盛世龙药业有限公司)提供。

    1.2 主要器材与试剂

    二氧化碳培养箱(MCO-15AC型，SANYO)，倒置显微镜(XDS-2B型，重庆光电)，超净台(SW-CJ-1D型，江苏通净)，分光光度计(NANODROP 2000，Therno scientific)，酶标仪(MultiSkan3，Therno scientific)，离心机(Centrifuge 5415D，Eppendorf)。

    MEM α, Nucleosides(GIBCO，12571063)，EBSS(GIBCO，14155063)，胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(GIBCO，12664-025)，胰酶(锐尔康,REK3012) ......