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编号:1418733
清肠温中方治疗急性溃疡性结肠炎大鼠的拆方研究
http://www.100md.com 2020年8月7日 环球中医药 2020年第7期
方组,沙拉,1材料与方法,1实验动物,2主要试剂仪器,3实验用药,4拆方分组,5模型建立,6分组给药,7标本取材,8结肠组织病理学评价,9免疫组织化学染色,10酶联免疫吸附实验,11Westernblot实验,12
     石磊 李军祥 韩啸 刘佳丽 路琼琼 寇富舜 孙中美 丁庞华 毛堂友 王志斌

    溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)是一种慢性非特异性炎性结直肠疾病,主要影响18~50岁的中青年,有腹泻、黏液脓血便和腹痛等症状。因本病难治愈、易复发、癌变风险高,UC已被世卫组织列为难治病。近年来,除常规治疗药物外,又新增了如:粪菌移植[1]、选择性白细胞吸附[2]等技术手段,但以上药物或疗法具有疗效不稳定、停药后易复发、不同程度的毒副作用、价格较贵等问题。中医药在诱导缓解、协同西药增效减毒、提高生活质量、预防复发等方面有较明显优势[3]。

    清肠温中方是课题组带头人李军祥在继承董建华院士学术思想下,根据多年临床总结而成,特提出其病机属脾阳不足、湿热内蕴、瘀血内阻,治以温中健脾、清热燥湿、凉血化瘀。前期课题组在单中心的双盲双模拟RCT临床观察中发现,本方具有改善轻、中度活动期UC患者临床症状、降低疾病活动度并提高生活质量的疗效;动物实验也证实了该方具有减轻炎症、修复黏膜病变的作用。

    为了进一步揭示本方的功效,本研究遵循“法依病机,拆方依法”的研究思路,将清肠温中方根据病机拆分为:温中健脾的炮姜、炙甘草;清热燥湿的黄连、青黛、苦参;凉血化瘀的三七、木香、地榆炭,并将以上三者两两组合,开展清肠温中方的拆方研究。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    健康雄性SPF级SD大鼠79只,体重(200±20)g,购自斯贝福(北京)生物技术有限公司(许可证号:SCXK(京)2016-0002),常规饲养于北京中医药大学SPF级动物房,12小时光照/黑夜循环,温度(22±2)℃,湿度50%~60%,自由饮食饮水饲养。实验过程符合北京中医药大学学术委员会实验动物伦理分委员会制订的伦理要求。

    1.2 主要试剂仪器

    葡聚糖硫酸钠(0216011080,美国MP Biomedical);大鼠IP10 Elisa试剂盒(CSB-E08182r,武汉华美生物工程有限公司);大鼠CXCR3 Elisa试剂盒(JL13105,上海江莱生物科技有限公司);小鼠抗HIF-1α单克隆抗体(ab1,美国Abcam);小鼠抗Cytokeratin8单克隆抗体(ab9023,美国Abcam);兔抗Vimentin单克隆抗体(ab92547,美国Abcam);酶标仪(MultiSkan3;美国Therno scientific);电泳仪(Mini Ge Tank,美国Therno scientific);转膜仪(Mini Blot Module ......

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