祝赫 石玉莹 吴映秀 肖茜 唐洪梅

    腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome，IBS-D)是一种慢性肠病，属于中医“泄泻”“腹痛”“郁证”范畴，主要症状为反复发作的腹胀、腹痛、腹泻。“脑-肠”轴异常、“神经-内分泌-免疫”系统紊乱是主要的发病机制，发病因素涉及饮食、心理、肠道菌群等。中医理论认为，肠易激综合征的病位在肠，以脾虚为本，症候属脾胃。以中医“健脾止泻”思想组方的肠激安方为广州中医药大学第一附属医院名老中医长期用于治疗IBS-D的临床验方，由四君子汤、痛泻要方加减化裁而来，具有益气健脾、止痛止泻之功效，治疗IBS-D临床疗效确切。

    MicroRNAs (miRNAs)是长度为18～25个核苷酸的一类内源性的非编码的小分子RNA，对疾病的发生发展具有“多途径”“多靶点”作用特点，与中医理论整体观有一定的趋同性，现代研究证实miRNA可以作为中药发挥作用的介导因子，中药可能选择性地通过作用于多个miRNA及其转录因子-靶基因，调控细胞功能改变和疾病治疗网络，从而发挥复杂的生物学作用。近期有研究发现miRNA-29a作为肠道通透性的关键调控基因，可以通过靶基因调节肠道上皮屏障功能的完整性[1]。

    IBS-D发病机制复杂多样，课题组前期采用三因素结合的方法，成功制备了病证结合的IBS-D大鼠模型。本研究拟基于miRNA-29a，探讨肠激安方对IBS-D模型大鼠的干预途径和作用机制，为肠激安方的临床使用提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级新生SD大鼠，由广州中医药大学实验动物中心提供[许可证号SCXK(粤)：2013-0034]。哺乳期母鼠和乳鼠同窝饲养于高压灭菌木屑垫料的大鼠专用饲养笼中。保持昼夜明暗交替12 h/12 h，噪音≤60 dB，饲养环境温度20～25℃，相对湿度控制在50%～70%，实验动物自由进食进水，实验动物饮用水为高压灭菌纯净水。动物实验地点：广州中医药大学第一附属医院实验动物中心[SYXK(粤)：2013-0092]。按3R原则对实验动物给予人道关怀。

    1.2 主要药物与试剂

    肠激安方中药饮片由康美药业生产，购自广州中医药大学第一附属医院，经广州中医药大学第一附属医院药检室鉴定。肠激安方药物组成：茯苓20 g、甘草6 g、陈皮5 g、石榴皮30 g、黄连5 g、白芍15 g、土白术15 g、枳壳10 g、延胡索10 g、乌梅15 g、防风15 g、柴胡10 g、黄芪15 g ......