刘卫红 贾丽超 张蕾 康群甫 周明学

    动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是目前占中国城乡居民总死亡原因首位的心脑血管疾病最主要的病理基础，是一个多因素、多阶段的慢性炎症过程，发病机制复杂，至今尚未完全阐明。新近研究表明，肠道菌群衍生物脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)通过介导炎症反应促进了动脉粥样硬化的发展[1-4]。因此，研究抑制慢性炎症损伤的药物对AS的治疗可能具有潜在的临床应用价值。

    动脉粥样硬化的中医病机主要为痰、瘀、虚。当归芍药散出自《金匮要略》，除了治疗各种妇科疾病的“妇人腹中诸疾痛”外，还被广泛应用于内、外、神经、皮肤、男、五官、眼等临床各科疾病。当归芍药散“血水同治”的组方特点，与动脉粥样硬化的病机特点相一致。有研究表明，当归芍药散具有改善脂代谢紊乱的作用[5-8]，本课题组前期研究[9-10]已证实当归芍药散可以显著降低代谢性炎性小鼠血脂和炎性因子水平。

    因此，本研究用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症模型，观察当归芍药散含药血清对炎症因子及信号通路的影响，明确当归芍药散的抗炎作用并阐明其内在机制。在中医异病同治理论指导下，扩大经典名方的应用范围，为其防治动脉粥样硬化的临床应用提供可靠的实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 细胞株

    小鼠巨噬细胞RAW 264.7购于中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心。

    1.2 药物与试剂

    当归芍药散组成：泽泻80 g、当归30 g、赤药160 g、川芎30 g、茯苓40 g、白术40 g。中药饮片由北京中医医院中药房提供，制剂中心制备成散剂。

    当归芍药散含药血清的制备：SPF级Waster大鼠，雄性，40只，体重(200+10)g，随机分为空白组和给药组，每组各20只。给药组按成人临床等效剂量直接折算成大鼠用量，大鼠每日给药剂量为0.44 g/kg,每天给药两次，连续给药4天，第5天给药后1～2小时(给药前禁食不禁水12小时)，用0.6%的戊巴比妥钠麻醉，1 mL/100 g，腹主动脉取血，室温静置2小时进后，3000 r/min离心10分钟，无菌分离血清，56 ℃灭活30分钟，-80℃保存。使用时，以DMEM不完全液稀释为所需浓度。空白对照组每天给同等剂量的溶质(蒸馏水)，给药剂量及给药时间同给药组。

    LPS(美国Sigma 公司，批号L2550)；白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6,批号558301)、单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemotactic protein 1,MCP-1,批号558342)试剂盒均购自北京利文商贸有限责任公司；Cell Counting Kit-8(Dojindo Laboratories公司 ......