王乐鹏 王婷 霍瑰阳 蔡亚楠 刘文斌 黄光瑞 袁凯

    阳虚体质是中医人体九种体质的一种类型。阳虚体质人群常常表现出怕冷、容易疲劳、肌肉松软等阳虚相应的特征[1]。外泌体是近年来兴起的重要研究领域[2]。2013年的诺贝尔奖表彰了发现外泌体调控运输机制的三位科学家。外泌体是一种由于细胞内溶酶体微粒内陷而造成的囊泡[3]。该囊泡中包含了非常复杂的蛋白质与RNA。外泌体中的RNA包括mRNA、miRNA、lncRNA以及其他各种非编码RNA[4]。外泌体参与多种生物学功能，包括作为介质工具传递相关信号，从而实现细胞与细胞之间信息的交流[5]。目前在多种疾病的研究中，均发现外泌体在疾病的发病过程中发挥着重要作用。如肿瘤的微环境中，外泌体参与肿瘤的生长、分化、凋亡和转移[6]。除了参与肿瘤发病，既往研究还发现外泌体参与的信号调节非常广泛地参与神经系统疾病、心血管疾病、内分泌疾病的病理生理过程[7]。

    本研究将中医阳虚体质与外泌体结合起来研究，利用高通量测序技术，分析阳虚体质人群外泌体miRNA表达谱。通过对miRNA表达谱的研究，希冀得到外泌体在阳虚体质人群中的相应作用。为相应体质人群防病治病得到理论支撑。

    1 材料与方法

    1.1 血液样本来源

    本研究从北京中医药大学在校学生中招募志愿者，共招募阳虚体质3名，平和体质3名。健康人平和体质与阳虚体质根据中华中医药学会2009年实施的《中医体质分类与判定》来判定，并且接受中医专家诊断。所有参与者在进入研究之前均已签署书面知情同意。参与者无慢性疾病，无心、肝、肾、消化道、呼吸、血液、神经系统等疾病；体格检查未发现临床意义的阳性体征；实验室检查未发现异常。根据纳入标准和排除标准，本研究共纳入受试者6名，包括3名阳虚体人，3名平和体质人。阳虚体质的症状特点包括手脚凉、胃脘部背部怕冷、穿衣多、不耐受寒冷、易感冒、冷饮后不适、冷饮后腹泻等。平和体质包括精力充沛、说话有力、睡眠良好、适应外界环境变化等。6名受试者均为北京中医药大学在校学生，能够减少教育程度与年龄等混杂因素影响，从而能够更好比较阳虚体质与平和体质的差异。本研究抽取每位参与者20 mL外周血。研究对象为循环外泌体RNA ......