固本抑瘤Ⅱ号对乳腺癌小鼠RECQL4蛋白和mRNA表达的影响
阿霉素,货号,原位,1材料与方法,1细胞及实验动物,2试剂及仪器,34T1乳腺癌荷瘤小鼠模型制备,4分组及给药,5小鼠体重,原位瘤长短径及瘤重测量,6RealtimePCR检测原位瘤组织RECQL4
徐晓华 刘敏 李可欣 张青据GLOBOCAN 癌症数据统计,2018年全球乳腺癌新发病例为2088849,死亡病例为626679,其发病率(11.6%)和死亡率(6.6%)位居女性首位[1]。尽管目前有放疗、化疗、内分泌治疗、靶向治疗等多种治疗手段,但仍无法完全根治此病,寻找更有效的治疗方法是目前乳腺癌治疗亟待解决的问题。
RECQL4属于RECQ解旋酶家族(WRN,BLM,RECQL4,RECQL1和RECQL5)之一,存在于端粒和线粒体,具有解旋酶活性[2],是正常细胞和癌细胞DNA复制起始因子之一,可以参与维持基因组稳定性的蛋白质相互作用[3]。RECQL4 基因C端区域突变可导致具有癌症易患性的Rothmund-Thomson综合征[4],此外,RECQL4蛋白和/或mRNA也可在乳腺癌[5]、胃癌[6]、肝癌[7]、前列腺癌[8]、骨肉瘤[9]等多种肿瘤中过表达,且多与预后不良相关。故本研究以固本抑瘤Ⅱ号为主,通过体内实验观察其疗效,并探索其与RECQL4表达的关系。
1 材料与方法
1.1 细胞及实验动物
4T1-荧光素酶标记(4T1-luc)小鼠乳腺癌细胞来自首都医科大学附属北京中医医院中心实验室。SPF级雌性BALB/c小鼠,6~8周龄,体重20±2 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2016-0011。小鼠饲养于首都医科大学实验动物科学部,独立通风笼(IVC)环境中。本研究已通过首都医科大学动物伦理委员会批准(AEEI-2018-089)。
1.2 试剂及仪器
固本抑瘤Ⅱ号由生黄芪(13.45%)、党参(6.73%)、女贞子(6.73%)、茯苓(4.48%)、生白术(4.48%)、枸杞子(6.73%)、仙灵脾(4.48%)、川芎(4.48%)、鸡血藤(13.45%)、莪术(4.48%)、肿节风(6.73%)、浙贝母(6.73%)、苦参(5.38%)、水蛭(2.69%)、昆布(8.97%)共15味药物组成,均购自首都医科大学附属北京中医医院。煎煮方法:将草药放入锅内,加入10倍体积去离子水,浸泡30分钟后开始加热,煮至沸腾,继续煎煮30分钟,将第一煎药液用80目筛过滤后盛出。锅中继续加入5倍体积去离子水进行第二煎,煮沸后煎煮25分钟 ......
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