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编号:608852
基于凋亡机制院内制剂抗瘤丸优化方-4对U87裸鼠移植瘤动物模型实验研究
http://www.100md.com 2021年9月26日 环球中医药 2021年第9期
缓冲液,微血管,胶质瘤,1材料和方法,1动物与细胞,2药物,3试剂及仪器,4人神经胶质瘤U87细胞的培养方法,5模型制备,6分组与给药,7指标检测,8统计学方法,2结果,1各组U87裸鼠肿
     冯英楠 陈菲 王晓萌 王海征 林晓兰

    胶质瘤是中枢神经系统最常见的一类肿瘤,约占颅内所有肿瘤的35.26%~60.9%[1]。胶质瘤具有侵袭性生长、恶性程度高等特点。目前,治疗神经胶质瘤主要采取手术为主,辅助放疗、化疗等方法,但是胶质瘤生存期短,死亡率高,对人类健康威胁极大。中药因其较好的安全性和有效性在肿瘤的治疗中发挥积极作用,抗瘤丸是适用于脑胶质瘤、脑垂体瘤的辅助治疗的院内制剂,临床应用近30年,服用的患者累计10万余人次,于2012年获得国家发明专利(专利号:ZL 2010 1 0234220.2)。

    课题组前期研究也证实,抗瘤丸的抑制神经胶质瘤细胞作用可能与诱导胶质瘤细胞的凋亡相关[2-3],提示对治疗胶质瘤有良好的开发和应用前景。抗瘤丸优化方-4是抗瘤丸的优化处方之一,基于前期优化处方研究[4-5]发现,本实验的抗瘤丸优化方-4抑瘤效果较好,故本实验进一步对抗瘤丸优化方-4进行研究。抗瘤丸优化方-4是在原方的基础上,通过中医药专家论证,减少了6味佐使药。本实验通过观察对相关指标表达的影响,进一步阐明抗瘤丸优化方-4治疗胶质瘤的作用机制,为抗瘤丸处方优化提供数据,为进一步开发抗瘤丸提供相关的实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 动物与细胞

    SPF级健康雄性BALB/c裸鼠,雄性,体质量17~19 g,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2012-0001;人神经胶质瘤U87细胞(株),购于中国协和医科大学基础医学研究所基础医学细胞中心(ATCC,CCL-107)。

    1.2 药物

    抗瘤丸是由白花蛇舌草、半枝莲、白英等18味中药组成的院内复方制剂。抗瘤丸优化方-4是抗瘤丸的优化处方,由首都医科大学宣武医院药剂科提供。阳性对照药替莫唑胺(批号:H20080313),购于美国先灵葆雅制药公司。

    1.3 试剂及仪器

    胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(批号:20120517),购于天津市灏洋生物制品科技有限责任公司;DMEM培养基(高糖)(批号:1177237)、胰蛋白酶(批号:0458)、无钙、镁磷酸盐缓冲液(10×PBS,PH 7.2-7.4)(批号:20120815) ......

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