张宁宁 吴力群 陈海鹏 霍婧伟 徐方蔚 廖欣婷 李盼盼 路晨 陈宇航

    咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma，CVA)是一种以咳嗽为主要或唯一临床表现的特殊类型的哮喘，是中国儿童慢性咳嗽的主要原因[1]。本病儿童虽无明显喘息、气促等表现，常因遇冷空气或者运动后加剧，反复发作，若不及时治疗易发展为哮喘，严重影响患儿的学习生活和身心健康。加味六安煎是临床治疗儿童咳嗽的有效方剂[2]，课题组前期通过大鼠实验研究发现，本方可通过调整CVA大鼠模型体内的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)及白细胞介素(interleukin，IL)-5水平从而减轻炎性细胞浸润及水肿程度，减轻咳嗽次数[3]。同时通过调整基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9，MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinases-1, TIMP-1) MMP-9/TIMP-1的平衡从而有效减轻气道重塑[4]。本实验拟通过加味六安煎对CVA豚鼠模型血清及支气管肺泡灌洗液(brocho-alveolar larage fluid, BALF)中IL-4、IL-13水平及气道重塑相关基因转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β) mRNA、MMP-9 mRNA表达的影响，进一步探讨其治疗CVA的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选用健康4周龄纯系雄性豚鼠30只，清洁级，体质量250～300 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。许可证号：SCXK(京2016-0011)。

    1.2 实验药品

    加味六安煎药物组成：法半夏6 g、橘红6 g、茯苓6 g、杏仁6 g、白芥子6 g、甘草3 g、海浮石20 g、葶苈子6 g、瓜蒌10 g、胆南星4 g、炒莱菔子10 g，低、中、高剂量组分别配制成浓度为0.74 g/mL、1.48 g/mL、2.22 g/mL的溶液。药物由北京中医药大学东方医院制剂室制备；孟鲁司特钠(杭州默沙东制药有限公司产品，规格：4 mg/片)，用生理盐水制成混悬液，于4℃冰箱保存。药品由北京中医药大学东方医院中药房及康仁堂药业提供；卵蛋白(ovalbumin,OVA)(批号: 421C033, Solarbio公司)；氢氧化铝(批号: 20131125，国药集团化学试剂有限公司)；辣椒素(纯度>95% ......