韦薇 覃骊兰 李莉 郑伟灏

    过敏性疾病(allergic disease)反复发作且难以根治已经成为全球最受关注的公共卫生问题之一[1]。据世界变态反应组织统计，近30年来，过敏性疾病的发生率至少增加了3倍，目前全球总患病率已达22%。近年来，特异性生物标志物、信号与蛋白相关机制是过敏学科的研究热点[2]。肥大细胞是过敏性疾病发病的主要效应细胞，存在于机体的大多数组织如皮肤、呼吸道、黏膜、腹腔中，被抗体激活的肥大细胞脱颗粒后产生的炎性介质与细胞因子会参与多种炎症免疫性疾病如过敏反应、哮喘等，所以肥大细胞脱颗粒机制在过敏性疾病的发展进程中起到关键性作用[3-7]。研究发现调控白细胞介素信号与磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases, PI3K)/蛋白激酶B (protein kinase B，PKB/Akt)信号通路，与治疗过敏性疾病密切相关[8-10]。目前，现代医学治疗此病主要以控制疾病症状为主，无法有效缓解反复发作，而且副作用明显[11]，而中医药治疗过敏性疾病有着独特的优势，疗效显著，且副作用较小。现代研究表明玉屏风散在治疗哮喘、鼻炎、荨麻疹等过敏性疾病都有显著疗效[12-14]，且玉屏风散可以显著减轻肥大细胞脱颗粒，可以通过抑制肥大细胞脱颗粒相关作用机制来治疗过敏性疾病[15-17]。因此，本研究通过建立体外肥大细胞脱颗粒模型，来验证玉屏风散发挥抗过敏反应的作用是否与肥大细胞脱颗粒作用机制和PI3K/Akt/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路有关。

    1 材料与方法

    1.1 药物与试剂

    玉屏风散浸膏：根据2015版《中华人民共和国药典(一部)》玉屏风项下提取方法，按3∶1∶1比例取黄芪600 g、防风200 g、白术200 g，将200 g防风予以碎断，加4倍量的水浸泡2小时，蒸馏提取5小时，另收集蒸馏后的水溶液，将蒸馏后的药渣与600 g黄芪、200 g白术一起煎煮2次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎液，过滤，滤液浓缩至适量，加适量乙醇至含醇量70%，搅拌，静置，过滤，滤液加压回收乙醇，加入挥发油及蒸馏后的水溶液，浓搅拌，静置，取上清液，过滤，滤液浓缩得156.611 g浸膏量(1 g浸膏含6.3852 g生药)，置-20°冰箱保存备用。

    黄芪、防风、白术(广西仙茱中药科技有限公司，批号：20190101、2019040、20190602)；胰酶(武汉贝茵莱生物科技有限公司 ......