柴胡软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型桥本甲状腺炎大鼠Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响
金水,1材料与方法,1实验动物,2实验药物,3试剂与仪器,4大鼠模型构建,5动物分组与给药,6流式细胞术检测大鼠外周血Th1,Treg细胞,7酶联免疫吸附法检测各组大鼠血
许可 张碧辰 商雪纯 张兰桥本甲状腺炎(hashimoto’s thyroiditis,HT)又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎,是临床上常见的导致甲状腺功能减退的主要原因之一[1]。随着社会发展和人们生活、工作压力的增加,甲状腺疾病发病率逐年升高,威胁人们健康[2]。HT在中医统属于“瘿病”,情志失调、肝郁脾虚均与HT的发病有关[3]。HT是一种特异性自身免疫性甲状腺疾病,CD4+T细胞可分化为辅助性T细胞1(helper T cell 1,Th1)、辅助性T细胞2(helper T cell 2,Th2)、辅助性T细胞17(helper T cell 17,Th17)、调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)细胞亚型,参与炎症反应、细胞免疫、体液免疫应答、免疫调节,并维持机体免疫平衡,研究表明Th1/Th2、Th17/Treg细胞失衡与HT等多种自身免疫性疾病的发生有关[4- 5]。逍遥散具有疏肝健脾、软坚散瘿的功效,临床上能够降低HT患者炎症因子水平,改善患者症状[6]。本研究通过构建肝郁脾虚型HT大鼠模型,探讨柴胡软坚消瘿颗粒对肝郁脾虚型HT大鼠治疗的效果及可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
无特定病原体级Sprague Dawley雌性大鼠(182~214 g),选购于辽宁长生生物科技有限公司,许可证号码:SCXK(辽)2015-0001,饲养于辽宁中医药大学动物实验中心,常规喂养,适应性饲养1周。研究经本院动物伦理道德委员会批准。
1.2 实验药物
柴胡软坚消瘿颗粒剂:当归10 g、白芍15 g、柴胡6 g、茯苓10 g、太子参15 g、白术6 g、海藻8 g、昆布8 g、酒萸肉10 g、山药10 g、熟地黄20 g、陈皮8 g、清半夏6 g、香橼6 g、佛手6 g,江阴天江药业有限公司生产的中药颗粒剂;金水宝片(产品批号:201112)江西济民可信药业有限公司。
1.3 试剂与仪器
完全弗氏佐剂,不完全弗氏佐剂,猪甲状腺球蛋白,无水碘化钠,美国西格玛公司(货号分别为:F5506、F5881、A9011、7681-82-5);甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine ......
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