张迪 晏军 钱莹 姚兴伟 付跃峰 郭楠 刘清泉 孔令博

    铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa，PA)是医院环境中最主要的病原菌，PA引起的院内肺炎占到院内肺炎病例的18%以上，最新研究显示，院内肺炎的死亡率已经到了13%～50%[1-2]。高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1，HMGB1)是一种重要的晚期炎性介质，受到PA刺激后，单核巨噬细胞将其分泌到细胞外环境发挥促炎作用。HMGB1通过促进核因子κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)核转位释放炎症细胞因子，如白细胞介素6(interleukin-6，IL-6)，炎症细胞因子进一步促进HMGB1的释放，形成一个正反馈回路，放大炎症级联反应[3-5]。耐药PA肺炎在感染途径、发病特点和病机上与中医学伏邪理论存在高度的一致性。扶正透邪方扶正以助透邪，透邪以助扶正，针对耐药PA肺炎有益气养血、透邪外出之功。前期研究证明扶正透邪方在早期可升高体内白介素1β(interleukin-1β，IL-1β)水平，刺激促炎因子释放，帮助清除细菌和毒素[6]，但对后期的炎症反应研究不足。本实验通过观察扶正透邪方对耐药PA肺炎HMGB1水平的影响，及NF-κB和IL-6等相关细胞因子的表达，进一步探讨扶正透邪方对耐药PA肺炎的作用机制，为临床应用提供依据，同时丰富伏邪理论的科学内涵。

    1 材料与方法

    1.1 实验药物

    扶正透邪方组成：黄芪60 g、当归15 g、金银花15 g、青蒿10 g、虎杖10 g，以上药物均为中药全成分免煎颗粒，由北京康仁堂药业有限公司提供。

    1.2 实验菌株

    耐药铜绿假单胞菌临床分离株，样本号：20PXSP1925，经北京中医药大学东直门医院细菌室进行菌种鉴定与药敏检测。

    1.3 试剂与仪器

    HMGB-1(批号：SEA399Ra)、IL-6 ELISA(批号：SEA079Ra)检测试剂盒，购自武汉云克隆科技股份有限公司；UltraPure Agarose(批号：16500100)、SuperScript III RT 逆转录kit(批号：11752050)、Sybr qpcr mix(批号：4472920)，均购自美国ABI-invitrogen；HMGB1抗体(批号：Ab79823)、NF-κB抗体(批号：Ab76311)，购自英国Abcam公司。酶标仪Microplate reader ......