魏茂林 杨珍 董晓英 冯逊逊

    早发性卵巢功能不全(primary ovarian insufficiency，POI)是一种严重的内分泌和生殖系统功能紊乱疾病，是介于卵巢储备功能下降和卵巢早衰之间的一种卵巢低反应状态，主要表现为卵巢内卵泡池减少和卵泡功能障碍[1]。POI的发病率逐年升高，严重影响了女性的生殖健康。

    研究表明，POI的发生与卵巢微环境密切相关[2]。蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)蛋白可以抑制卵巢氧化应激的发生，改善卵巢微环境，对卵泡发育有一定的积极作用[3]。Akt通过多种机制被激活，活化磷酸化Akt通过抑制结节性硬化症(tuberous sclerosis complex，TSC)复合物TSC1和TSC2，直接或者间接地激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammlian target of rapamycin,mTOR)通路[4]。前期研究表明，毓麟珠可以通过激活mTOR信号通路，调整通路中S6K和4E-BPl等相关蛋白的表达，对免疫性POI模型小鼠卵泡发育有积极影响[5]。在此基础上，本研究观察中药毓麟珠对免疫性POI小鼠卵巢组织氧化应激状态、卵巢组织病理形态以及TSC1、TSC2、Akt和mTOR下游相关蛋白等表达的影响，探讨其治疗免疫性POI的机制机理。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选定84只6～8周龄动情周期正常的SPF级BALB/c雌性小鼠，体质量18～22 g。该批动物由北京维通利华公司提供，批号为SCXK(京)2012-0001。实验经北京中医药大学动物实验伦理委员会审批，批号：AEEI-2015-028。

    1.2 实验药物

    1.2.1 造模试剂 用高精度电子秤称取6 mg ZP3透明带多肽粉末[根据小鼠透明带3(ZP3)330-342个氨基酸序列(NAAAAQFQIHGPR)合成，加入6 mL蒸馏水，溶解混匀，制成透明带多肽溶液]，其中一半与等量的弗氏完全佐剂混匀作为免疫制剂，另一半与等量的弗氏不完全佐剂混匀作为免疫增强剂。透明带多肽粉末购自杭州中肽生化有限公司(批号：CR-10-0068Z)，弗氏完全佐剂(批号：F5881)、弗氏不完全佐剂(批号：F5506)购自美国Sigma公司。

    1.2.2 中药 毓麟珠药物组成：当归、熟地黄、菟丝子各12 g，人参、麸炒白术、茯苓、白芍、杜仲、鹿角霜、川椒各6 g，川芎、炙甘草各3 g。中药饮片均由北京同仁堂有限公司提供。剂型为水煎剂 ......