王惠玲 雷迪 赵思阳 司海龙

    自噬是真核细胞在相关蛋白和基因调控下，通过溶酶体系统清除细胞中的非正常细胞器，是重要的细胞内降解机制[1]。当细胞受到各种刺激，如营养变化、代谢压力等改变时，自噬活性会极大提高[2]。正常情况下，细胞自噬有利于细胞保持自身稳态，防止有毒或损伤蛋白质和细胞器的累积，维持着细胞健康生理功能。当自噬被抑制时，细胞凋亡启动，可加速细胞死亡[3]。大量的研究证实肾脏足细胞自噬的异常与糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease，DKD)的发病和进展密切相关[4]。Podocyte即肾小球脏层上皮细胞(glomerular epithelial cells，GEC)，是维持肾小球滤过屏障主要的细胞之一[5-6]。足细胞是高分化细胞，在人体中很难再分化，一旦损伤则不能再生，因此足细胞受损是DKD发病及进展的标志之一[7]。

    近年来DKD发病率迅猛增长，成为终末期肾病(end stagerenal disease，ESRD)的最常见病因[8]。目前，DKD的治疗包括健康的生活方式、降糖药物、RAS抑制剂、免疫抑制剂使用等，上述治疗措施在DKD的某些阶段确可发挥部分作用，但其副作用不容忽视，且随病程推进依然不能阻止DKD进一步发展。中医药治疗DKD可延缓病情进展，疗效显著。水陆地黄胶囊以清代医家程国彭《医学心悟》的六味地黄汤为基础，陕西省名中医马居里教授将其加减化裁为生黄芪、熟地黄、山药、山萸肉、泽泻、茯苓、丹皮、丹参、芡实和金樱子十味药物，并命名为水陆地黄胶囊(该胶囊由六味地黄汤及水陆二仙丹组成，前期命名为糖肾一号胶囊，现改名为水陆地黄胶囊，较前期命名体现其药物组成)，该药具有益气养阴，活血化瘀之功效，临床上用于DKD的治疗并取得良好的疗效。前期研究发现，水陆地黄胶囊能有效降低DKD患者血清基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein,MMP)-9、MMP-2水平，提高基质金属蛋白酶抑制剂-I(tissue inhibitor of metalloproteinase-I, TIMP-I)水平，减轻尿微量白蛋白，缓解临床症状，延缓肾脏纤维化[9]。本课题在前期研究基础上，观察水陆地黄胶囊是否可通过激活肝激酶B1/腺苷酸活化的蛋白激酶/沉默信息调节因子-1(LKB1/AMPK/Sirt1)信号通路调节足细胞自噬活性。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    60只SD大鼠，雄性，体质量约200 g，SPF级 ......