周可林 董硕 国生 魏培栋 付国兵 杨靖颐

    抑郁症具有高患病率、高复发率、高致残率、高自杀倾向的特点，已成为严重影响人类身心健康的公共卫生问题。《疾病和有关健康问题的国际统计分类》[1]将低动力与情绪低落、兴趣/愉快感缺失作为抑郁症的核心症状，因此有学者提出了抑郁症的能量代谢假说，认为抑郁症的低动力症状可能与线粒体能量代谢障碍相关[2-3]。前期研究[4]发现振腹推拿可以明显改善抑郁症患者的症状评分，对于患者的情绪低落、精力减退等症状有明显的改善作用，因此本研究拟通过慢性不可预见性温和应激方法(chronic unpredictable mild stress, CUMS)建立抑郁症大鼠模型，探究振腹推拿手法对于抑郁症模型大鼠骨骼肌腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate，ATP)含量、活性氧(reactive oxygen species，ROS)含量、呼吸链Ⅰ～Ⅴ含量以及辅酶Q10、线粒体内转录因子A(mitochondrial transcription factor A, TFAM)以及 SQSTM1(sequestosome-1)蛋白含量的调节作用，分析振腹推拿改善抑郁症能量代谢异常的干预作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    健康雄性SD大鼠(SPF级)40只，体质量为(330±20)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司[许可证号：SCXK(京)2012-0001]。所有大鼠在北京中医药大学动物房(SPF级)中饲养，室温条件(21±2)℃，相对湿度保持在30～40%，光照保持正常昼夜节律，并且饲养环境保持安静。常规饲料和常规饮用水饲养，大鼠健康状况良好。本研究中所进行的所有动物操作行为和实验方法均按照北京中医药大学动物实验伦理委员会颁布的实验动物福利和伦理指南严格执行，动物实验过程由受过专业培训的研究生进行并尽量减少实验动物的痛苦。

    1.2 实验试剂

    ATP含量测定试剂盒(南京建成生物工程研究所，货号：A095-1)；线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ试剂盒(南京建成生物工程研究所，货号分别为：A089-1、A089-2、A089-3、A089-4、A089-5)；蛋白提取液、蛋白酶抑制剂、二抗(MDL，货号分别为：MDL91201、MD912893、MD932477)；SQSTM1一抗、TFAM一抗(Affinit，货号分别为：AF5384、DF3232)；辅酶Q10一抗(abcam，货号：ab41997) ......