钱唐亮 张玉婷 侯秀娟 刘小平 郑炜 康天伦 王海瑜

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以慢性、侵袭性关节炎为主要表现的自身免疫疾病，30至50岁为其发病高峰[1]。根据发病年龄可将其分为两类，其中青年发病并迁延至老年的RA患者称为青壮年发病类风湿关节炎(younger onset rheumatoid arthritis，YORA)；60岁及以后发病的类风湿关节炎，称为老年期发病类风湿关节炎(elderly onset rheumatoid arthritis，EORA)[2]。EORA相比于YORA往往发病更急，关节肿胀的临床症状更加严重。在治疗上，EORA相比于YORA对抗风湿药物的耐药性差，需要更多的联合用药[3-4]，这就增加了老年患者本已不佳的身体负担。现在许多临床研究发现了中医药在RA治疗中发挥着重要的作用[5]。本课题组前期临床研究发现加味芍甘附子汤在改善RA患者的关节功能和生活质量方面疗效确切[6]，其主要通过调节Egr2为核心的炎性通路而达到免疫调节作用[7]。在此基础上，本实验进一步探讨加味芍甘附子汤对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis，CIA)老年鼠早期生长反应蛋白2(early growth response protein 2，Egr2)表达及其下游炎症因子的影响，比较EORA与YORA临床特征差异化的内在机理，探索RA群体的治疗方案。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    清洁级雌性Wistar大鼠96只，其中青年鼠[3～4月龄，体质量(256.9±12.7)g]48只，老年鼠[12～13月龄，体质量(391.15±58.5)g]48只，均购于北京维通利华实验动物技术公司，许可证号：SCXK(京)2012-0001。

    1.2 实验药物

    加味芍甘附子汤：白芍15 g、制附子15 g、鸡血藤15 g、甘草10 g、青风藤15 g(以上药物由北京中医药大学东方医院药剂科统一采购)，全部药材经煎煮、过滤、水浴蒸发至每mL药液含生药材1.42 g。雷公藤多苷片(湖南千金协力药业有限公司，规格：10 mg，生产批号：6936492500053)，用蒸馏水配制为1 mg/mL。

    1.3 主要仪器及试剂

    牛Ⅱ型胶原(美国Chondrex公司)；不完全弗氏佐剂(美国Sigma公司)；TRIZOL(Invitrogen，型号10296028)；UltraPure Agarose(ABI-invitrogen ......