左归丸对6.0 Gyγ射线损伤大鼠卵巢组织凋亡和p53蛋白表达的影响
颗粒细胞,卵母细胞,卵泡,1材料与方法,1实验动物以及模型制备,2主要仪器与试剂,3实验分组以及药物制备,4观察指标及检测方法,5统计学处理,2结果,1各组大鼠卵巢组织病理切片分析,2各组大
赵粉琴 赵艳 刘洁颖 胡芝霞 苟雅姣 谢知慧 李淑萍放射治疗手段已经成为恶性肿瘤延缓生命的一种方法,尤其是盆腔放射治疗对对卵巢造成不可逆的损伤成为卵巢功能早衰(premature ovarian failure,POF)的主要原因之一[1-2],严重影响女性生殖健康。雌激素补充治疗虽然可以治疗POF引起的一系列症状,改善生育以及维持骨量有一定意义[3]。但是长期用药可导致内膜癌和乳腺癌[4-5],因此,限制其在临床的使用。肾藏精,主生殖,为天癸之源,故《傅青主女科》有“经水出诸肾”之说[6]。左归丸作为经典的滋补肾阴的药物,临床用来治疗骨质疏松[7-8]、闭经以及围绝经期综合征[9-11]取得很好疗效。但是左归丸对于辐射损伤卵巢的保护作用机制方面研究目前未见相关报道,基于肾主生殖的中医理念,本实验采用模拟临床肿瘤治疗的放射剂量对大鼠进行照射,用左归丸进行干预处理,观察大鼠血清性激素水平、卵巢组织凋亡率,以及p53蛋白表达情况,探讨左归丸对于辐射损伤卵巢的修复作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物以及模型制备
雌性SPF级8周龄SD大鼠60只,体质量(220±20)g。实验动物许可证号:SYXK(甘)2015-0005。在自然光照条件下(白/昼12小时/12小时)饲养,3天后用于实验研究。随机分为照射组(50只):照射条件:γ射线6.0 Gy,6 mV,剂量率3 Gy/分钟,照射时长:2.2分钟, (甘肃省人民医院放疗科,高能直线加速器,型号:ONCOR Impression Plut),照射源皮距为100 cm,在10 cm×10 cm特制铅模中,照射野大小为2.0 cm×2.0 cm照射范围;正常组(10只):不进行照射常规饲养。
1.2 主要仪器与试剂
倒置显微镜(日本OLYMPUSC×31,型号:CX21FS1);蛋白电泳仪(Bio-rad,型号:164-5050);ELISA激素水平检测试剂盒(CUSABIO,96T);卵泡雌激素(follicular stimulating hormone,FSH)批号:CSB-E06869r;黄体生成素(luteinizing hormone ......
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