丹酚酸A通过调节氧化应激抑制LPS诱导的人脐静脉血管内皮细胞NLRP3炎性小体的表达
批号,1材料与方法,1实验细胞,2主要试剂和仪器,3CCK-8检测细胞活力,4酶联免疫吸附法检测HUVECs中炎性因子肿瘤坏死因子-α(transformingnecrosi
张淼 邓悦 于克英 常丽萍 田腾辉 石锐 邵笑动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是由于胆固醇物质的过度沉积从而导致动脉硬化及管腔狭窄,进而在动脉壁上累积聚集形成AS[1]。炎症反应是AS的主要病因之一[2]。其中脂质沉积及炎性因子的释放能够造成内皮损伤、平滑肌细胞迁移及巨噬细胞极化,进而导致细胞外基质扩张,形成纤维帽,促进动AS斑块的形成[3]。
丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)是唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBge.)的根茎中的主要活性成分,具有抑制氧化应激、抗炎、调节脂质代谢、保护血管内皮功能等作用[4],但尚未明确其对血管内皮细胞及炎性小体的影响和机制。因此本研究采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)造成炎性损伤,观察Sal A对HUVECs中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及炎性小体相关指标的表达的影响,旨在明确Sal A对HUVECs损伤保护作用,为中医药预防和治疗AS提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 实验细胞
HUVECs(武汉普诺赛生命科技有限公司)培养于DMEM培养基中(含10%胎牛血清及1%双抗),培养箱条件:37℃,5%CO2。
1.2 主要试剂和仪器
Sal A(索莱宝公司,批号:200D301);LPS(索莱宝公司,批号:820F038);胎牛血清(美国Clark公司,批号:FB25025);青链霉素双抗(美国Hyclone 公司,批号:SV30010);磷酸盐缓冲溶液(美国Hyclone 公司,批号:AC10257442);CCK-8试剂盒(索莱宝公司,批号:CA1210,);ELISA试剂盒(上海优选生物公司,批号:T1320);ROS检测试剂盒(碧云天生物技术公司 ......
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