杨臻瑞 史晓光 汪唐顺 左禧萌 刘洁丽 冯雪 王玉坤 陆叶丽

    三阴性乳腺癌为一类雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2，HER-2)均为阴性的乳腺癌，虽然其转移复发风险较其他类型乳腺癌更高，但目前的治疗方案局限于手术、放化疗及靶向治疗等，难以达到理想效果[1]。近年来槐耳颗粒已被证实能够辅助化疗治疗三阴性乳腺癌[2]，其作用机制考虑为抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、逆转化疗耐药及抗肿瘤心血管生成等[3]。本研究探讨槐耳颗粒抗肿瘤对磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B-mammalian target of rapamycin，PI3K-AKT-mTOR)信号通路的作用，并以此探究其治疗三阴性乳腺癌的机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞系及培养条件

    三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞购自北京协和医院细胞库，细胞系经STR鉴定且无支原体。以DMEM高糖溶液(Biosharp，中国)加入10%胎牛血清(四季青，中国)和青霉素(100 U/mL)链霉素(100 mg/mL)溶液(Biosharp，中国)配置为完全培养基后培养,培养条件为5%CO2，37℃的加湿培养箱。

    1.2 主要试剂

    槐耳颗粒(启东盖天力有限公司，国药准字Z20000109)，用DMEM充分溶解，制成终浓度为16 mg/mL的培养基母液，0.22 μm滤膜过滤2次，短期(一周内)4℃保存。细胞计数试剂(cell counting kit-8，CCK-8)检测试剂盒(Biosharp，中国),原位末端转移酶标记技术法(TdT-mediated dUTP nick end labeling，Tunel)凋亡荧光检测试剂盒(Proteintech，中国)，蛋白酶抑制剂cocktail、RIPA细胞裂解液(索莱宝，中国)，磷脂酰肌醇3 (phosphatidylinositol 3-kinase ......