陈超 缪艳燕 李慧君 李卫岗 张文生

    陈皮分“陈皮”和“广陈皮”，为中医药临床常用药，具有理气健脾，燥湿和胃的作用。陈皮用药载于《广州府志》：“入药以广陈皮为贵，出新会者最良。”茶枝柑是新会陈皮的品种来源[1]，又名新会柑。明代刘文泰在《本草品汇精要》中提到橘皮“谨按青橘、黄橘”，“功用既殊，性味亦异”，但在采摘时间上提及黄橘“十月取实”，在《中华本草》中，规定陈皮十至十二月果实成熟时取下。《中药大词典》注解橘皮来源于“10月以后采摘成熟果实”，其所含的挥发油、多糖、多酚、黄酮等成分具有较强的药理活性作用[2]。从陈皮中分离并鉴定的140种化学成分中，除挥发油外，黄酮类化合物是主要的生物活性和特征成分[3]。现代药理研究表明，黄酮类化合物具有较强的抗氧化、抗菌、抗肿瘤及心脑血管保护作用[4]，其中又以橙皮苷[5]、川陈皮素[6-7]、橘皮素[8]及多甲氧基黄酮[9]等成分的药理研究较多。基于此，全面解析新会陈皮黄酮类成分的质量标志物(quality marker,Q-marker)[10]对提高新会陈皮的临床应用具有重要意义。

    本研究首先通过新会陈皮代谢组学鉴定出黄酮类化合物，查找主要作用靶点，构建从分子到蛋白，从蛋白到疾病的分子网络；之后利用基因本体注释(gene ontology，GO)[11]和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG)[12]等生物信息富集分析，从信息学角度探索主要黄酮类化合物与其药用价值的关联性；最后采用分子对接技术，以核心靶点蛋白的配体作为对照，评估黄酮化合物与靶点蛋白结合的可能性，并耦合文献检索证据为黄酮类化合物作为新会陈皮Q-marker提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 仪器

    超高效液相色谱(SHIMADZU Nexera X2)串联质谱(Applied Biosystems 4500 QTRAP)，美国安捷伦公司；烘箱(UF160plus)，Memmert；离心机(5425 R)，Eppendor；超低温冰箱(902GP-ults)，Thermo Fisher。

    1.2 试药

    茶枝柑果皮经干燥后作为样品，采样时间为2020年11月中旬，地点为新会东甲村果园(新会站北200米)。甲醇(色谱纯，Merck)，乙醇(色谱纯，Merck)，标准品(色谱纯，BioBioPha/Sigma-Aldrich)。

    1.3 陈皮成分UPLC-MS/MS前处理 ......