牟天龙 刘慧敏 潘彦舒 贺桂芳 李占稳 郭婕 庞大承 翟臻 吴自旭

    宫颈癌是目前危害女性健康的第二大恶性肿瘤，具有高发病率，高病死率、发病年龄年轻化的特点，严重威胁女性健康[1]。光动力疗法(photodynamic therapy，PDT) 是近年来新兴的一种疗法，具有操作简便、创伤小、定位准确、治疗时间短，价格低廉等优点，在肿瘤治疗方面有着广阔的前景[2]。目前唯一批准应用于临床的光敏剂为苯卟啉衍生物单环酸A，此外常用于实验研究的还有5-氨基酮戊酸等，这些均属于二代光敏剂。但因传统光敏剂有着对皮肤、眼睛及呼吸系统等不同程度的刺激作用，且本身并不具有良好的抑瘤效果，因此需要一种更为合理的光敏剂。1985年印度学者首先报道了姜黄素的抑瘤作用，且其本身可食用，毒副作用低，目前美国国立肿瘤研究所将其列为第三代癌化学预防药[3]。此外，姜黄素具有较好的光敏性，既能够协同、也能单独发挥抗癌功效，这在本研究团队过去的研究中已经证实[4]，因此本实验选择姜黄素做为光敏剂联合不同剂量及治疗频次的光动力疗法进行研究，以便找到合理的治疗参数，同时对其抑瘤机理做进一步探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及细胞

    雌性 BALB/c 裸鼠60只 (北京维通利华实验动物技术有限公司，动物合格证编号SCXK(京)2016-0011)，实验动物使用许可证SYXK(京)2017-0033 ，饲养于北京中医药大学科研实验室IVC动物房，伦理审批号：BUCM-4-2018122101-4065。宫颈癌Hela细胞(北京协和医学院馈赠)。

    1.2 主要仪器及试剂

    姜黄素(Bioruler 公司，美国，货号：RB12712，规格20 mg)。445 nm激光器(北京镭志威光技术有限公司 BL18111611)，肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)(abcam-ab6671)，半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)(abcam-Ab25901)，山羊抗兔二抗，即用型二步法检测试剂盒 PV9000(北京中杉金桥)， BCA蛋白定量试剂盒、eECL-Westen Blot高灵敏度化学发光检测试剂盒、光谱彩虹预染蛋白Marker(康为世纪公司)，组织细胞裂解液(北京普利莱公司)，台式冷冻离心机Eppendorf(USA)，凝胶成像分析系统Tanton-4500(CHN) 。

    1.3 造模

    体外培养宫颈癌细胞，将肿瘤细胞调整为2.5×107/mL ......