李芳钊 霍瑞卿 韩宇帆 孙阔 田军彪

    脑梗死后及时恢复缺血区血流会引起氧化应激反应、炎症反应、兴奋性氨基酸毒性和脑水肿和细胞凋亡等一系列联级反应，这一现象称为脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemic reperfusion injury，CIRI)。脑水肿会引起并加重迟发性神经元损伤，是脑缺血再灌注过程中重要病理环节，影响患者功能恢复和愈后，是病情恶化、降低治疗效果的重要原因[1]。水通道蛋白(aquaporin，AQP)作为一种跨膜水转运蛋白，参与调节细胞内外水平衡，其在脑水肿病理生理学机制中起到重要作用。在脑内已发现的AQPs中，AQP4与AQP9是脑内表达量最多、与缺血性脑损伤发生后脑组织含水量增加密切相关的水通道蛋白[2-3]。由于大脑水通道蛋白主要作用机制为调节组织细胞内水液代谢，因此当脑组织出现水肿等异常水液代谢时，调控AQP4和AQP9的表达可能起着关键作用。本课题通过运用经验方化浊解毒活血通络方，观察大脑水通道蛋白表达水平，探究化浊解毒活血通络方减轻脑缺血再灌注损伤急性期大鼠脑水肿的可能调节机制及潜在作用靶点，为临床治疗缺血性脑血管疾病提供广阔思路和科学实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    健康成年清洁级雄性SD大鼠60只，体质量250～300 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供动物许可证：SCXK(京) 2016-0006。提供适宜生存环境，自由进食和饮水，定期更换垫料。

    1.2 动物模型建立及分组

    1.2.1 动物模型建立 参照Longa法[4]并结合既往研究经验制备大脑中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)大鼠模型：术前12小时禁食不禁水。全程无菌操作。大鼠称重严格控制在250～280 g范围内，通过腹腔注射10%的水合氯醛醛3 mL/kg麻醉，颈部备皮，碘伏消毒后做颈部正中切口，充分暴露并剥离出右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，在颈总动脉近心端和颈内、外分叉处系一活结，颈外动脉分别于近头端和靠近颈内、外分叉处系2个死结，颈总动脉系活结处和颈内动脉处使用微动脉夹阻断血流，在2个死结之间用动脉剪斜行剪开一个“V”形小口，将实验前备好的鱼线线栓(直径0.26 mm、长3 cm、过蜡2 mm)从开口处插入血管，轻系分叉处活结用来固定线栓，将线栓进入到颈总动脉时，剪断颈外动脉近头端处死结，通过提起颈外动脉上剩余所系死结并转换方向将线栓从颈总动脉转至颈内动脉，取下颈内动脉微动脉夹 ......