孔妍 邹伟 关睿骞 刘双岭 陈奥 崔乃松

    缺血性脑卒中属“中风病”范畴，最早见于《内经》中“卒中”“薄厥”等[1]，是由于脑血流供应不足导致局部脑组织缺血、缺氧引发的急性脑功能障碍性疾病，该病具有“四高一多”的特点，即发病率高、致残率高、致死率高及并发症多[2]，严重威胁到人类的生命健康。缺血性脑卒中占全部脑卒中类型的60%～80%，治愈率极低，且越来越趋于年轻化[3]，如何针对本病给予及时有效的治疗干预，减轻卒中后的各种神经和肢体功能障碍，一直是临床医师研究关注的重点问题。近年来，将中医治疗手段与现代康复技术相结合用于临床各种功能障碍的治疗，已取得了长足进展，其中以针灸和现代康复技术结合应用最为广泛[4-5]。针康法是将头穴丛刺法与康复训练同步结合进行的一种治疗方法，较之单一治疗手法能够更大限度地发挥二者的优势，达到疗效最大化[6]，已在临床广泛应用于脑卒中的康复治疗[7-8]。研究发现，缺血性卒中后星形胶质细胞的激活和反应性胶质化，能够触发级联炎症反应和胶质瘫痕生成，从而加重缺血性神经功能损伤[9-10]。本实验拟通过研究针康法对局灶性脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion，MCAO)大鼠神经功能及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)/信号传导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)通路的影响，探讨针康法干预星形胶质细胞活化保护神经功能的相关作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级健康雄性SD大鼠，体质量(250±20)g，购于黑龙江中医药大学GLP实验动物中心，实验动物使用许可证号：SYXK(黑)-2016-004，并经黑龙江中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号JZLLSC2019-0160)。于12小时/12小时昼夜循环交替，温度20～22℃，湿度50%～60%实验环境下，适应性喂养1周，维持自由进食、饮水。

    1.2 实验试剂

    山羊血清封闭液、TBST溶液、苏木素染液(国药集团化学试剂有限公司，批号：191002/S200201/200102)；辣根过氧化物酶、ECL化学发光试剂，Trizol试剂盒，逆转录试剂盒(Sigma-Aldrich公司，批号：191101/020115/200403/200211)；DAB 显色试剂盒、BCA 蛋白含量检测试剂盒(南京建成生物工程研究所 ......