羚羊角水解液的氨基酸薄层鉴别与含量测定
天冬氨酸,1仪器与材料,1实验仪器,2实验药物,3实验试剂,2方法与结果,1羚羊角水解液的薄层色谱分析,2羚羊角水解液的薄层耐用性考察,3羚羊角水解液中游离氨基酸的分析,4方法学考察,3讨论
刘妍 刘静 陈扬 赵苑伶 张雪 陈林珍 赵崇军 马志强羚羊角为牛科动物赛加羚羊SaigatataricaLinnaeus的角,是传统名贵中药材之一,始载于《神农本草经》,在我国已有2000多年的药用历史。羚羊角性寒,味咸,归肝、心经,具有平肝息风、清肝明目、散血解毒的功效,主治肝风内动、惊痫抽搐、妊娠子痫、高热痉厥、癫痫发狂、头痛眩晕、目赤翳障、温毒发斑、痈肿疮毒[1]。羚羊角颗粒是由羚羊角水解液经加工而成的现代药物制剂,氨基酸是羚羊角的主要成分之一[2-3]。目前笔者未见国内文献用微乳液来分离鉴别动物中的氨基酸。微乳薄层色谱(microemulsion thin layer chromatography,METLC)的展开剂是微乳液,因其具有较大的增溶量和超低界面张力,能让难以分离的复杂体系和难溶化合物得以分离[4-6],近些年来已经成功运用于生物碱[7]、黄酮[8-11]、糖类[12]、氨基酸[13]等多种化合物的分离鉴别中。为了更好地对羚羊角水解液中的氨基酸进行分析,本实验采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)—正丁醇—正己烷—水按质量比(1.5∶7.0∶1.0∶1.7)为展开剂对羚羊角水解液中的氨基酸进行定性鉴别,用异硫氰酸苯酯柱前衍生法对水解液中16种游离氨基酸进行含量测定,进一步丰富了微乳液应用于氨基酸薄层鉴别研究的方法,也为羚羊角药材的质量控制提供研究基础。
1 仪器与材料
1.1 实验仪器
十万分之一分析天平(Mettler Toledo公司),循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司),N-1100型旋转蒸发仪,水浴锅(上海爱朗仪器有限公司),Sorvall ST 8R台式高速冷冻离心机(美国Thermo Fisher Scientific公司),硅胶G板(100 mm×100 mm,青岛海洋化工厂分厂,批号:20181205、20190322、20190802),硅胶G板(企业A,批号:20200410),1 μL、2 μL定量点样毛细管(润泽康),双槽P-1型薄层色谱展开缸(100 mm×100 mm),DHG-9023A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司),高效液相色谱仪(Waters 2695)包括2695四元梯度泵,自动进样器,2998 PDA检测器,在线脱气机,柱温箱,Empower色谱工作站。
1.2 实验药物
羚羊角对照药材,中国食品药品检定研究院,批号:PS210423-04;羚羊角粉(过200目筛),企业B ......
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