张一凡 刘萍

    冠状动脉粥样硬化是多种心血管疾病的共同病理基础[1]。近些年研究人员逐渐聚焦到胞葬作用及其在动脉粥样硬化中的作用[2]，胞葬作用通过吞噬细胞(如巨噬细胞、上皮细胞)及时清理凋亡细胞，促进炎症消退及胆固醇逆向转运，缩小坏死核面积，增加斑块稳定性[3]。小鼠骨髓源巨噬细胞通常被用来体外基础实验研究，但对其胞葬作用的研究较少。

    本课题组结合中医理论和前期的临床研究，以瓜蒌薤白半夏汤为基础方，化裁得到冠心康。冠心康由黄芪、丹参、瓜蒌、薤白、半夏、益母草组成，具有益气化痰活血之效。前期研究发现，冠心康可以促进小鼠腹腔巨噬细胞、脾脏巨噬细胞、RAW264.7细胞的胞葬作用改善动脉粥样硬化[4-6]。因此，本实验旨在观察冠心康冻干粉(以下简称“冠心康”)对小鼠骨髓源巨噬细胞小分子类泛素修饰物特异性蛋白酶1(small ubiquitin-related modifiers /sentri-specific proteases 1，SENP1)/信号传导蛋白和转录激活物(signal transducers and activators of transcription 3，STAT3)分子表达及胞葬作用的影响，进一步探讨冠心康治疗动脉粥样硬化的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    雄性C57BL/6J小鼠6只，6周龄，体质量为18～23 g，购于江苏集萃药康生物科技有限公司。动物生产许可证号：SCXK(苏)2018-0008，动物合格证号：202000150。饲养于上海中医药大学附属龙华医院SPF级动物实验室。动物实验方案经上海中医药大学附属龙华医院伦理委员会批准(实验动物伦理号:2019-N002)。

    1.2 试剂与仪器

    RIPA裂解液(批号：P0013B)、BCA蛋白定量试剂盒(批号：P0010)、SDS-PAGE电泳试剂(批号：103019200702)、中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(批号：030521210525)，巨噬细胞集落刺激因子(批号：100421211007)，均购自碧云天生物技术有限公司； STAT3、P-STAT3、GAPDH抗体(货号：34、12、7) ......