艾灸对于三阴性乳腺癌移植瘤小鼠缺氧诱导因子-1α及糖酵解激酶影响的实验研究
荷瘤,1材料与方法,1实验动物与细胞株,2主要试剂与仪器,3动物造模,4艾灸干预,5指标观测,6统计学处理,2结果,1艾灸对移植瘤增殖的影响,2艾灸对荷瘤小鼠体质量与生存率的影响,3艾
陈军 孙嫘 惠建荣 李秀玉 胡蓉 李静2019年国家癌症中心发布了最新统计数据,中国女性乳腺癌每年发病约30.4万,高居女性肿瘤发病的首位,尤其是三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)发病率逐年升高,常规治疗十分有限,是目前亟待解决的公共卫生难题。现已证实,TNBC的恶性表型及放、化疗耐受均与其肿瘤细胞代谢方式密切相关[1]。糖酵解是恶性肿瘤显著的生化特征,即使氧供充足,肿瘤细胞依然采用糖酵解作为其获得能量的主要方式,这种代谢称为“瓦伯格效应”[2]。现代研究证实艾灸的生物学机制与干预机体能量代谢模式有关。如,艾灸较针刺可以更有效调节骨骼肌能量代谢[3];艾灸足三里可提升其穴位局部Na+/K+-ATP酶活性[4]。本课题组前期研究发现,艾灸可缓解晚期肿瘤患者癌因性疲乏,改善生活质量[5]。以上均证明,艾灸可有效参与能量代谢的调节。
本次研究以三阴性乳腺癌细胞移植瘤小鼠为研究模型,观察艾灸对于荷瘤小鼠的干预作用,探究艾灸调控肿瘤代谢的机制是否与抑制瓦伯格效应有关,为探寻TNBC的中西医综合治疗提供研究借鉴和理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物与细胞株
BALB/c雌性野生小鼠80只,体质量25~30 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2016-0006;饲养于26~27℃、12/12小时光照/黑暗交替的环境中;Luci-MB-231细胞株购自于军事医学科学院细胞中心。
1.2 主要试剂与仪器
缺氧诱导因子-1的RNA逆转录试剂盒(Roche公司,批号:RAB1057)。缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)(批号:ab92498)、α-酮戊二酸(2-Ketoglutaric acid,α-KG)(批号:ab83431)、己糖激酶(hexokinase2,HK2)(批号:ab273721)、丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2 ......
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