王媛媛 邱鹏程 杜洋 郑淑娴 薛玉叶 孙光强 陆云阳 汤海峰

    脑胶质瘤起源于神经胶质细胞，是最常见的颅内肿瘤之一，其特征在于快速生长和高侵袭性[1]，年发病率约为(3～6.4)/10万[2]。世界卫生组织分类系统根据恶性程度将其分为I～IV级，属于恶性级别较高的为III～IV级[3-4]。由于胶质瘤浸润性生长及高复发率的临床特征，在采用手术切除后放疗联合替莫唑胺化疗等多种治疗手段下仍预后不佳，因此迫切需要寻找新的抗胶质瘤药物[5-7]。

    重楼皂苷I(polyphyllin I，PPI)(C44H70O16，又称重楼皂苷D)是中药重楼的主要成分之一，也是中国药典(2020版)规定的重楼含量检测成分之一。重楼皂苷药理作用有抗菌、抗炎、止血、抗肿瘤等，其中抗肿瘤作用得到了较深入的研究[8]，表明它们对膀胱癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、肺腺癌等多种肿瘤细胞的生长有显著抑制作用[9-11]。已有研究证实重楼皂苷I(D)对胶质瘤具有显著抑制作用，如：重楼皂苷D通过Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)通路诱导U87人脑胶质瘤细胞凋亡[12]；重楼皂苷I通过JNK途径诱导胶质瘤细胞U251凋亡以及阻滞细胞周期[13]；通过分子对接模拟PPI与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)的结合方式及作用模式，从而验证PPI直接靶向STAT3抑制U251细胞增殖并诱导凋亡[14]；重楼皂苷D诱导Nb-69细胞凋亡，以及IMR-32和LA-N-2细胞坏死[15]。高级别胶质瘤具有高度侵袭性，其高度侵袭性表型限制了治疗的效果[16-17]。抑制迁移对肿瘤的侵袭具有重要作用，但PPI对胶质瘤细胞的迁移作用尚未见报道。因此，本文在验证PPI对胶质瘤U373和U251细胞凋亡的基础上，进行PPI抑制胶质瘤细胞迁移的研究。

    1 材料与方法

    1.1 细胞来源

    胶质瘤U251细胞(目录号：TCHu 58)购自中国科学院上海细胞库，U373购自美国ATCC细胞库，并经过STR鉴定。

    1.2 仪器

    超净工作台(Thermo Fisher)，CO2恒温培养箱(ESCO公司)，IX83倒置显微镜(Olympus)，血球计数板(上海市求精生化试剂仪器有限公司)，Multiskan FC 酶标仪(赛默飞公司)，流式细胞仪(BD FACSCalibur)，电泳系统(Bio-Rad) ......