艾灸对庆大霉素致听力损伤豚鼠模型的干预效应及其作用机制
耳蜗,1材料与方法,1实验动物,2主要试剂及仪器,3动物分组,造模与干预方法,4指标检测,5数据处理,2结果,1干预后各组豚鼠clickABR阈值比较,2耳蜗螺旋韧带血管纹观察,3豚鼠耳蜗组织中MDA与S
崔静文 胡慧突发性耳聋也称急性特发性感音神经性听力损失或特发性突聋,72小时内突然发生的、原因不明的感音神经性听力损失,至少在相邻的两个频率听力下降≥20 dBHL。该病是耳鼻喉科常见病和疑难病之一,其病因病机错综复杂,研究认为突发性耳聋的主要病因学说有病毒感染、药物影响、应激反应和免疫因素等学说[1]。耳蜗血管因其特殊的解剖结构,当受到各种原因影响出现微循环障碍时,局部就会蓄积大量自由基,当其超过耳蜗中抗氧化酶的清除作用时,即可造成毛细胞的损伤改变或坏死,造成听力下降[2]。庆大霉素的耳毒性造成伤害的途径主要来自于活性氧的生成,活性氧在内耳造成一系列反应,被认为是最早的事件,最终引起毛细胞的凋亡[3]。本研究以庆大霉素耳毒性造成豚鼠听力损伤模型,旨在探究艾灸对于庆大霉素耳毒性造成的豚鼠模型是否具有清除氧自由基,改善微循环,抑制细胞凋亡的功能,以探究其在治疗突发性耳聋中的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
选用耳廓反射灵敏的白色红目健康豚鼠18只,雄性,体质量250~350 g,耳廓声音反射灵敏,无噪音暴露史及药物使用史。豚鼠饲养于北京中医药大学东方医院动物房,标准饲料养于清洁级环境中,室温22~26℃,实验前适应性饲养一周。豚鼠购自北京为通利华公司,动物批号:No.110011201110102486。经实验动物伦理委员会伦理审查许可。
1.2 主要试剂及仪器
1.2.1 主要仪器 脑干诱发电位仪(首都医科大学耳鼻喉科研实验室提供),显微手术器械,解剖显微镜,超净工作台,-80℃低温冰箱,台式高速冷冻离心机(THERMO)。
1.2.2 主要试剂 硫酸庆大霉素粉剂,戊巴比妥钠,蒸馏水,9%氯化钠注射液,10%中性福尔马林固定液,0.5%伊红乙醇染色液,中性树胶,95%乙醇,无水乙醇等。
1.2.3 实验耗材 自制豚鼠固定袋,1 mL一次性注射器,5 mL 一次性注射器,棉签,5 mL、10 mL、50 mL EP 管,烧杯50 mL,镊子,止血钳,剪刀,移液管,移液枪,组织剪,安瓿瓶,液氮,记号笔,豚鼠鼠料,豚鼠垫料等。
1.3 动物分组、造模与干预方法
18只豚鼠适应性分笼饲养一周后,随机分为3组,即庆大霉素组、庆大霉素+艾灸组和生理盐水组。干预方法见表1,具体如下:庆大霉素组腹腔注射硫酸庆大霉素120 mg/(kg·d),连续14天;庆大霉素+艾灸组肌注硫酸庆大霉素120 mg/(kg·d) ......
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