王帅 孙润权 刘奕志 刘思远 李志刚 王鑫

    阿尔茨海默病(alzheimer’s disease，AD)又称老年痴呆，是一种持续侵入型的中枢神经系统退行性疾患。其特征性病理改变为细胞外β-淀粉样蛋白(β-amyloid，Aβ)异常聚积形成淀粉样斑块(amyloid plaques)，神经元内微管相关蛋白tau蛋白过度磷酸化形成神经纤维缠结[1]。至今，据估计全世界有超过5000万人患有痴呆症，死亡率位列第五[2]。

    线粒体功能障碍是导致AD发生的重要细胞内变化[3]，当自噬被阻断时，Aβ可以聚集在线粒体膜上，通过改变神经信号因子转导，破坏线粒体结构和自噬功能，引起线粒体损伤和数量变化[4]。另外，自噬缺陷所导致的Tau 蛋白去除受阻，神经纤维缠结可能是AD的基本病理改变之一，Tau 蛋白的过度磷酸化可以导致线粒体脑内分布失衡[5]。前期研究发现，前额叶区腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase，AMPK)是调控线粒体质量的重要因子[6]，能有效对抗应激反应。此外，AMPK 能有效抑制雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)表信号传导，线粒体损伤相关的AMPK/mTOR途径可以诱导保护性自噬，激活自噬并触发溶酶体系统清除 Aβ[7]。

    本实验主要探讨“通督启神”法电针能否通过调控小鼠线粒体自噬因子(AMPK、mTOR)的释放，提高线粒体自噬的活性和质量，从而延缓AD 的病理进程，说明线粒体自噬功能不全可作为AD治疗靶点，为 AD的预防和治疗提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    清洁级6月龄雄性APPswe/PS1dE9(Amyloid Precursor Protin/Presenilin-1)双转基因小鼠30只，遗传背景相同的C57BL/6小鼠10只，体质量(28±2)g，购自江苏金致和生物科技有限公司(实验动物许可证号:SCXK(京)99 2014-0004)。饲养于首都医科大学附属北京中医医院中心屏障系统。

    1.2 试剂与仪器

    3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine，3MA)(货号：HY-19312)(规格：50.0 mg) 上海皓元生物医药科技有限公司； AMPK Alpha Monoclonal(Ptg公司，编号：66536-1-Ig)；MTOR Monoclonal Antibody(ptg公司 ......