孟英心 张子歆 王凌潇 马家乐 靳凤玉 王鑫玉 赵一慕 郑姣 屠鹏飞

    氧化应激损伤是多种心血管疾病的重要诱因，包括动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、心力衰竭等[1]。心血管疾病发病过程中，血液中的氧自由基和氧化低密度脂蛋白通过激活血管内皮表面的细胞信号通路刺激活性氧(reactive oxygen species，ROS)的产生诱发血管内皮细胞的过氧化损伤，从而导致动脉粥样硬化，因此寻找安全有效的抗氧化先导化合物是目前药物研发的热点。保元汤最早记载于《博爱明鉴》，是根据李东垣的黄芪汤所更改得来，包含人参、黄芪、肉桂、甘草四味药材，在中医理论上具有大补元气、治一切元气虚弱之症的功效[2]。

    近几年来保元汤在心血管疾病的临床应用上有着确切疗效[3]。本课题组前期对保元汤的化学成分做了系统的分离鉴定，共鉴定出皂苷类、黄酮类等236个化合物[4]，其中甘草与黄芪中的大量黄酮类成分可能是保元汤抗氧化的药效物质。通过前期筛选发现4＇,7,8-三羟基二氢黄酮(4＇,7,8-trihydroxydihydroflavonoid，TF)具有较强的抗氧化作用，因此本研究对TF改善人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)的过氧化损伤进行了系统的研究，以期阐明保元汤抗氧化的药效物质和作用机制，为其治疗心血管疾病的临床应用提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 保元汤处方与饮片

    保元汤由黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.)，人参(PanaxginsengC. A. Mey.)，甘草(GlycyrrhizauralensisFisch.)和肉桂(CinnamomumcassiaPresl)以6∶2∶2∶1的比例混合而成。原料药材于河北省安国药材市场购买，由屠鹏飞教授鉴定。TF从保元汤总提物中分离得到(图1)，纯度大于98%。

    图1 4’,7,8-三羟基二氢黄酮的化学结构式

    1.2 TF的提取与分离

    取黄芪饮片30 kg，人参药材10 kg，炙甘草饮片10 kg，肉桂药材5 kg，混合，以10倍量去离子水煎煮三次，每次2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩保元汤至密度约为1.10 kg/L ......