赵凡 张建军 蔡祥焜 邸松蕊 姜砚馨 吕美豫 田世民 王林元 郑立新 王淳

    高脂血症是临床上常见的一种慢性代谢性疾病,其发病隐匿,常诱发多种心脑血管疾病如动脉粥样硬化、脑血管意外、高血压、冠心病等疾病的发生。 长链非编码 RNA (long non-coding RNAs,LncRNAs)是一类长度超过200 个核苷酸、编码潜力有限的RNA,参与高脂血症、动脉粥样硬化、心肌肥厚、心肌纤维化等多种心血管疾病的调控[1]。 Lnc H19 是第一个被发现的LncRNA,具有多种生物学功能,参与调节细胞的增殖、分化和代谢。 研究发现,H19 在肝脏中含量丰富,其表达受脂肪酸的刺激,可作为一种脂质感受器调节肝脏代谢动态平衡[2]。 微小RNA(MicroRNA,Mi RNAs)为一种约22个核苷酸的内源RNA,是脂类代谢的转录后调节因子[3]。 可结合并靶向mRNA,通过调节其衰退、失稳或翻译抑制,以调节靶蛋白的丰度[4-5]。 在斑块的发生发展过程中,miRNA 可从斑块的细胞成分中释放到循环中,因此也常用作预测冠心病的生物标志物[6]。 生物学认为,LncRNAs 似乎是与 miRNA 通路相互作用的网络存在,LncRNAs 既是miRNA 的来源,也是其抑制调节因子[7]。

    中医学认为,高脂血症源在脾,标为痰、湿、瘀;发生多由于脾失健运,继而导致痰、湿、瘀等病理产物,同时也是致病因素的产生。 课题组前期研究中发现,健脾祛湿方可通过调节过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)/肝 X 受体 α(liver X receptor α,LXRα)/三磷酸腺苷结合盒转运体A1(adenosine triphosphate binding cassette transporter A1,ABCA1)信号通路显著改善脾虚湿盛型大鼠血脂异常情况。 目前有研究表明 PPARγ 是miR-130a/b 在前脂肪细胞、人肝细胞癌组织和肝细胞系中的靶标[8-9]。 故本实验以高脂血症大鼠为研究对象,探究健脾祛湿方调节血脂代谢的同时,选取Lnc H19、miR-130a-3p 为切入点,初步探讨健脾祛湿方作用靶点上游是否存在非编码RNA 的调控影响以介导肝脏的胆固醇逆转运通路。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF 级健康雄性 SD 大鼠,6 ~7 周龄,体质量(180±20)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司[许可证号:SCXK(京)2016-0011] ......