岳炳南 孙娇 李晓璐 周子娴 刘鑫 刘清国

    原发性高血压是一种常见的慢性疾病,导致了约62%的中风和49%的心脏疾病发作[1]。 目前,该疾病的主要治疗手段为口服药物,而电针降压则具有副作用少、绿色高效的优势。 本团队前期对电针降压机制进行了大量实验探究,研究发现针刺太冲穴可以通过提高不同靶脑区的葡萄糖代谢水平发挥其降压的中枢效应,而下丘脑室旁核在激活的脑区中表现十分活跃[2],课题组还验证了电针可降低血管紧张素II 及炎症因子的表达,延缓高血压疾病的发生发展[3],除此之外,电针还可以通过调节非编 码 RNA ( 如 microRNA) 降 低 血 压[4-5], 而microRNA 则通过参与转录后的基因表达调控,作用于下游受体蛋白,进而影响心血管系统相关细胞的基本功能[6-7]。 基于以上,课题组使用基因检测和分子生物学技术来验证电针对miRNA-9 的影响,通过miRNA-9 对高血压相关的炎症因子白介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor, TNF-α)、 血 管 紧 张 素 II ( angiotensinII,ANGII)、P2X7 受体(recombinant purinergic receptor P2X ligand gated ion channel 7, P2RX7),以及小胶质细胞的影响来探讨电针的降压机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组

    本实验采用自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat, SHR)为动物模型,12 周龄雄性SHR和Wistar Kyoto 大鼠(SPF 级,250 ~280 g)均购于北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号为SYXK(京)2016-0006。 所有动物单笼饲养,温度恒定在25 ~27℃,并给以12 小时的光照,自由进食、进水。 大鼠在组织提取前一天禁食禁水。 实验经北京中医药大学动物实验伦理委员会审批,所有动物手术均在10%水合氯醛麻醉的情况下严格进行,以减少动物痛苦。

    实验共分为五组,将40 只SHR 大鼠随机分为4组:假手术组、miR9 抑制剂+电针组、电针组、模型组(每组10 只),10 只 WKY 大鼠作为空白组。 其中,miR9 抑制剂+电针组行双极插管植入术后注射miRNA-9 拮抗剂,并给以两周电针治疗;假手术组予以注射相同剂量脑脊液,不电针但进行抓取;电针组注射相同剂量脑脊液,进行两周电针治疗;模型组、空白组均只进行抓取 ......