李晓俊 杨斌 谢京红

    多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)是在遗传、环境等多种复杂因素共同影响下引起的一种育龄期妇女常见内分泌及代谢紊乱疾病，主要临床特征包括：月经紊乱或闭经、高雄激素血症、多囊样卵巢、胰岛素抵抗等。越来越多的证据表明卵巢颗粒细胞(granulosa cell，GC)凋亡水平增加是PCOS的发生关键病理机制；其中Wnt信号通路是调节细胞增殖、凋亡的经典通路，在卵巢卵泡发育中至关重要[1-2]。目前促进PCOS卵巢GC增殖并抑制其凋亡是PCOS主要治疗策略[3]。中医学认为PCOS的发生与肾、脾、肝三脏功能失调，痰浊、瘀血阻滞密切相关。众多医家认为痰湿阻滞胞宫是PCOS发生的主要原因[4-5]。启宫丸具有健脾化湿，行气祛痰、启宫助孕的作用，在临床治疗PCOS中疗效显著。本实验通过观察启宫丸对PCOS大鼠性激素水平的表达、卵巢病理组织形态、凋亡状况及Wnt/β-catenin信号通路的蛋白表达的影响，探究启宫丸对PCOS模型大鼠的治疗作用及可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF级SD雌性大鼠，40只，5～6周龄，体质量为180～220 g，购自北京市华阜康生物科技股份有限公司。动物生产许证号：SCXK(京)2017-0001，室温(22±2)℃，相对湿度 55%～65%。

    1.2 药品与试剂

    来曲唑片，规格：2.5 mg/片，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：22003153。

    启宫丸，药物组成：半夏20 g、香附20 g、川芎20 g、白术20 g、神曲15 g、茯苓15 g、苍术12 g、橘红12 g、甘草6 g，药物均由中国中医科学院西苑医院中药房提供及质检，统一采用中药煎药机煎制，制成浓缩药液(含生药量0.735 g/mL)。

    炔雌醇环丙孕酮片，商品名：达英-35，德国拜耳医药保健有限公司，批号：KT09FJ52。

    羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，美国Sigma公司，批号：1002375619。

    1.3 主要仪器

    3K18型离心机(美国Sigma)，Olympus BX53型显微镜，TP1020型全自动脱水机(德国Leica)，RM2235型组织切片机(德国Leica)，Image-Pro Plus 6.0(美国Media Cybernetics)。

    1.4 实验方法

    1.4.1 造模 所有实验大鼠均进行2天的适应性喂养 ......