吴嘉威 王昊 刘雅洁 和蕊 何梦如 赵百孝

    近年来,相关研究发现脑内慢性炎症反应是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病的一个重要因素[1]。小胶质细胞在β淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)触发作用下,激活核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体,通过相关通路进一步诱导产生致炎性细胞因子和神经元毒性物质,最终导致神经元的损伤、死亡,加重AD病症[2-3]。因此从缓解脑内慢性炎症角度出发,探究延缓AD进程迫在眉睫。

    艾灸是非药物疗法组成之一,因其简便、有效应用于包括AD在内的诸多疾病研究[4-6]。其中艾燃烧生成物作为艾灸起效的机理之一[7],艾烟是艾燃烧生成物的主要成分,发挥着不可缺少的作用并引起人们的关注与探究[8-9]。本课题组前期研究提示艾烟在AD方面具有调节炎性因子,延缓AD病程等作用[10-12],但艾烟对于NLRP3炎性小体的作用尚未明确。艾烟的烟雾气体在空气中形成颗粒分子扩散,其形式在一定程度上与香烟类似,同时亦有报道说明香烟与AD密切相关,故本实验选用香烟烟雾作为对比,探究其二者对于NLRP3炎性小体的影响。

    本实验拟以艾烟作为干预方式,与香烟进行对比,通过观察艾烟与香烟对NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinas E-1, Caspas E-1)、Toll样受体4蛋白(toll-like receptor 4, TLR4)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)等炎性小体相关指标的影响,从神经炎症角度分析艾烟对AD的部分机制,同时验证香烟与AD的关系。

    1 材料与方法

    1.1动物分组

    6月龄APP/PS-1雄性小鼠36只,体质量为(30±2)g,购自北京唯尚立拓生物科技有限公司,许可证号:SCXK(京)2016-0009。将小鼠分为模型组、香烟组、艾烟组,C57BL/6小鼠作为空白对照组,每组12只。饲养环境温度维持在(22± 2) ℃,相对湿度(55±5)%,保持光照(8:00～20:00)和黑暗(20:00～次日8:00)交替。

    1.2干预情况

    艾烟组:每天抓取老鼠,固定于小鼠固定器(自制)中,然后将固定器放入玻璃柜中,玻璃柜内放置调试好的激光粉尘测试仪。点燃艾条,利用匀速空气动力扇使烟雾在玻璃缸中弥漫,每隔3分钟用粉尘测试仪测试其浓度,使玻璃缸中的艾烟浓度控制在5～15 mg/m3之间,每日艾烟干预1次,共20分钟,每周6次,共计8周 ......