靳凤玉 赵一慕 高云 阴紫钰 马家乐 王凌潇 赵云芳 郑姣

    动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)病因复杂,是导致心脑血管疾病发生和发展的重要病因。动脉粥样硬化的形成是一个慢性炎症过程,其特征是胆固醇在动脉内膜过度沉积,从而引起不同程度的血管腔狭窄和堵塞[1, 2]。泡沫细胞的形成被认为是动脉粥样硬化过程中最重要的细胞学改变,而巨噬细胞是泡沫细胞主要来源,因此抑制巨噬细胞泡沫化是防治动脉粥样硬化的手段之一。白细胞分化抗原36(cluster of differentiation, CD36)是巨噬细胞摄取氧化脂蛋白的主要受体,促使巨噬细胞转化为富含脂质的泡沫细胞,是动脉粥样硬化治疗的重要潜在靶点。

    人参为五加科人参属植物,其味甘,微苦,具有补气,固脱,安神,益智等功效。课题组前期对人参中分离得到的单体化学成分进行活性筛选,发现人参炔三醇(panaxytriol,PXT)对泡沫细胞形成具有明显的抑制活性。目前,尚未见PXT抑制泡沫细胞形成作用及机制报道,因此本论文以抑制泡沫细胞形成为切入点,探讨PXT抑制单核巨噬细胞脂质沉积的作用机制,为其治疗动脉粥样硬化诱发的心脑血管疾病提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 药物

    本研究所使用药物为课题组自制。课题组前期从人参中分离得到活性化合物,经MS、1H-NMR和13C-NMR鉴定与文献报道人参炔三醇结构一致,课题组鉴定其为人参炔三醇,纯度>98%。用二甲基亚砜溶解后,置于-20℃冰箱储存,实验时用1640培养基溶解为所需浓度。

    1.2 细胞

    急性单核细胞白血病细胞(THP-1)购于中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心(资源编号:1101HUM-PUMC000057)。

    1.3 试剂与仪器

    RPMI-1640培养基(Corning公司);0.25%胰蛋白酶(Corning公司);100×青霉素—链霉素混合溶液(Corning公司);胎牛血清(Corning公司);氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, oxLDL)(广州奕源生物科技有限公司);DiI-oxLDL(广州奕源生物科技有限公司);二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)(Sigma公司);佛波酯(PMA)(Sigma公司);甲醇(天津市致远化学试剂有限公司);脱脂奶粉(BD公司);PVDF膜(Millipore公司);ECL化学发光液(Thermo Fisher Scientific公司) ......