储烟阗 匡艳辉 严曾豪 王德勤 郭海彪 张偲偲 刘晓秋

    当归四逆汤来源于《伤寒论》[1],具有温经散寒、养血通脉的作用,主治血虚寒厥证,临床上常用于治疗类风湿性关节炎、原发性痛经等疾病见上述证候者,具有“异病同治”的疗效特色。其中,类风湿性关节炎是一种慢性免疫性疾病,其具体表现为关节炎症及疼痛,其作用机制复杂,病因不明。原发性痛经是指月经前后及行经期间出现下腹疼痛、坠胀等。两者严重影响患者生活质量。

    中药复方因其处方中药味多化学成分复杂,在经典名方开发全面质量控制过程中,明确处方中化学成分组成尤为重要。超高效液相色谱串联四级杆—静电场轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q-Orbitrap-MS)技术具有高分辨率、高灵敏度、高选择性等特点,在化学成分解析、药物代谢研究中应用广泛,对于定性分析复杂基质特别是中药复方中的多种组分来说是一个强有力的分析工具。网络药理学利用网络可视化展现成分—靶点—疾病之间的相互作用关系,广泛应用于中药复方预测机体生物网络的作用机制,但单一网络药理学研究存在针对性不强、预测精度低的短板。本研究拟利用现代中药分析UPLC-Q-Orbitrap-MS技术结合网络药理学分析其在类风湿性关节炎及原发性痛经中的作用机制,以提高网络药理学预测精度,探讨中医“异病同治”的科学内涵。

    1 材料与方法

    1.1 药物

    当归四逆汤流膏(批号:210405S),由广州白云山和记黄埔中药有限公司现代中药研究院自制,为棕褐色流膏,处方配比:当归(9 g)、桂枝(9 g)、白芍(9 g)、细辛(9 g)、木通(6 g)、甘草(6 g)、大枣(24 g),按照《伤寒论》原文记载煎煮,浓缩至流膏状作为供试品。

    1.2 试剂

    乙腈、乙酸均为色谱纯(德国默克公司);超纯水由实验室纯水仪自制。

    1.3 仪器

    赛默飞三合一高分辨质谱仪(Thermo Fisher Scientific Orbitrap Fusion Lumos,美国Thermo Fisher公司);Ultimate 3000超高效液相色谱系统(美国Thermo Fisher Scientific公司)、电喷雾离子源(ESI),CP225D十万分之一电子分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司);BSA224S-CW万分之一电子分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司);LDZ4-0.8离心机(北京医用离心机厂);Genie U12超纯水仪(上海乐枫生物科技有限公司)。

    1.4 供试品制备 ......