铁岩 李潇 杨鑫伟 刘浩龙 许利平

    糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)是糖尿病常见并发症之一,临床上主要通过控制血糖、改善神经微循环和营养神经等措施来防治DPN,但是西药治疗效果有限、成本较高且易发生药物依赖,DPN的治疗仍存在局限性[1]。中医认为DPN属于肢痹、脉痹、痹证、痿证等范畴,治疗在分型论治基础上多加用化瘀通络之品[2]。因鸡血藤具有良好的活血补血、舒筋活络功效,常用于治疗DPN[3],但其作用于DPN的物质基础和作用机制研究尚不清楚。

    本研究通过网络药理学和分子对接技术预测鸡血藤治疗DPN的活性成分及作用机制,采用UPLC-MS/MS测定鸡血藤水煎液化学成分,并通过细胞实验探究鸡血藤药效物质对DPN中雪旺细胞(schwann cell,SCs)可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 网络药理学分析

    1.1.1 鸡血藤活性成分及疾病靶点收集与筛选 通过数据库与分析平台(TCMSP,http://lsp.nwu.wdu.cn/tcmsp.php)中查找鸡血藤化合物信息,以口服生物利用度≥30%、药物相似性≥0.18筛选鸡血藤活性化合物。使用TCMSP、Symmap(http://www.symmap.org/)、pharmmapper(http://www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/)数据库对化合物进行DPN靶点预测。在GeneCards(http://www.genecards.org/)、 OMIM(http://omim.org/)和DrugBank (https://go.drugbank.com/)数据库中以“diabetic peripheral neuropathy”为关键词检索DPN相关靶点。将所有靶点在uniprot(http://www.uniprot.org/)数据库进行规范。

    1.1.2 蛋白质—蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络构建 将鸡血藤活性成分靶点与DPN相关靶点进行韦恩分析,交集靶点即为鸡血藤治疗DPN的潜在靶点,将其提交至String11.0数据库,得到PPI网络并进行可视化,计算各靶点度值。将排名前5的靶点作为鸡血藤作用于DPN的关键靶点。

    1.1.3 通路与功能富集分析 基于Metascape平台对鸡血藤治疗DPN的潜在靶点进行GO注释分析和KEGG通路分析,筛选排名靠前的生物过程和通路并对结果可视化 ......