董凯强 李彦楠 代宝安 敖与天 王一帆 邢佳 郭蓉娟

    抑郁症是一种以高发病率、高复发率、高致残率、高自杀率为特点,以情绪低落、快感缺失、精力降低等为主要临床表现的精神障碍类疾病,其降低了患者的生活质量并严重影响患者的社会心理功能[1]。抑郁症的病理机制十分复杂,尚未完全明确,目前一致认为抑郁症是一种多系统疾病[2-3]。近年来,抑郁症与免疫系统紊乱的之间的关系备受关注,越来越多的证据表明免疫功能的损伤与抑郁症的发生发展密不可分[4-5]。目前,中医对于抑郁症免疫系统紊乱的研究主要集中在免疫因子,而对于免疫细胞的研究较少[6]。醒脾解郁方由西洋参、石菖蒲、郁金、贯叶金丝桃四味药组成,为本课题组在王永炎院士理论指导下创制的方药。前期研究表明,该方治疗抑郁症临床疗效确切,同时可以改善抑郁大鼠的免疫功能,但其具体机制尚不明确[7-8]。因此,本研究拟采用慢性不可预见轻度应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)的方法建立抑郁大鼠模型,以选择性5-羟色胺再摄取抑制剂西酞普兰作为阳性对照药。探究醒脾解郁方发挥抗抑郁的作用的同时,对抑郁大鼠T细胞亚群的影响,以期揭示醒脾解郁方改善免疫功能的具体机制,为促进其进一步临床应用提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级SD大鼠,雄性,7～8周龄,体质量200～220 g,40只,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司,动物生产许可证号为:SCXK(京)2019-0010。所有动物饲养于北京迈德康纳生物技术有限公司实验动物中心,动物使用许可证号为:SYXK(京)2020-0050,环境温度为20～25℃,相对湿度60%,采用明暗各12小时交替的动物照明光循环照明,动物饮用水及笼具经高压灭菌锅灭菌处理,饲料及垫料均经辐照处理,自由饮水,动物的操作参考北京市实验动物管理委员会执行,符合规定的伦理要求,伦理许可证为:MDKN-2022-025。

    1.2 实验药物

    醒脾解郁方颗粒由西洋参、贯叶金丝桃、石菖蒲、郁金组成,为中药免煎颗粒剂,由山东新时代药业提供;西酞普兰(MCE,HY-14258,100 mg)。

    1.3 主要试剂

    FoxP3(abcam,ab215206);山羊抗兔IgG H&L (abcam,ab6721);FITC anti-Rat CD45(BioLegend,202205);PE anti-Rat CD4(BioLegend,201507);APC anti-Rat CD3(BioLegend,201413);PerCP anti-Rat CD8(BioLegend,201712);异氟烷(RWD,R510-22-10) ......