陈军 张兆星 米婧 屈红艳 胡蓉 李静

    2022年国家癌症中心发布了最新一期的全国癌症统计数据,2016年新发病例406.4万,其中胃癌占比39.7%,位列第三,且在农村胃癌发病人数最多。总死亡人数241.1万,其中胃癌占比28.9%,也位列第三,不可否认,胃癌已经成为严重威胁人民健康的疾病之一。尽管程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)负性检查点免疫治疗的部分数据提示改善了患者晚期生存[1],然而其有效率仍不到30%,其中大约63.2%的有效人群对PD-1抑制剂干预后均会迅速诱发免疫治疗耐药[2]。同时,研究发现在胃癌的免疫治疗失应答群体中,大概率的存在着疲劳、心境低落等抑郁核心症状[3]。抑郁的影响不仅仅局限于情绪和认知,甚至能够导致放疗、铂类、内分泌药物、分子靶向药物等多种治疗耐受[4]。因此,抑郁可能参与了免疫治疗的负反馈调控。在前期的动物实验中,本研究小组也证实慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)可诱导出荷瘤小鼠的抑郁样行为并显著促进肿瘤的增殖[5]。逍遥散是中医治疗“郁证”的代表方剂,疗效确切[6]。本实验通过构建胃癌荷瘤共病抑郁小鼠模型,来探究逍遥散对PD-1抑制剂是否有增敏作用及相关机制,为探寻胃癌的中西医综合治疗提供新的思路和科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与细胞株

    6周龄BALB/c雄性野生小鼠共70只(其中成功构建胃癌荷瘤小鼠63只,满足60只的分组要求),体质量20～25 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2016-0006;饲养于26～27℃、12/12小时光照/黑暗交替的环境中;小鼠MFC胃癌细胞株购自于武汉普诺赛生命科技有限公司,货号:CL-0156。

    1.2 主要试剂与仪器

    鼠源PD-1抑制剂(MedChemExpress公司,目录号:HY-P99144),小鼠吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)ELISA试剂盒(TSZ,德国,货号:LM-IDO-Mu);小鼠犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)ELISA检测试剂盒(菲恩生物,中国,货号:EM1862);小鼠芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)ELISA检测试剂盒(ZIKER,中国,货号:ZK-M5467) ......