赵珈瑶 白辰

    大量的临床及文献均证实多种肺组织炎症损伤的发生、发展及预后与以胃肠为代表的消化系统具有密切关系,这其中包括肠道内的菌群。“风温外薄,肺胃内应”,肠道菌群在呼吸系统感染的过程中发挥了重要的作用。麻杏石甘汤首见于张仲景的《伤寒论》,治疗肺炎肺损伤确有疗效,而麻杏石甘汤通过肠道菌群治疗肺炎的机制尚不明确。本研究采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)雾化吸入法制备大鼠急性肺损伤模型,通过高通量测序和代谢组学检测动物肠内容物,分析麻杏石甘汤干预后动物肠道菌群和代谢产物的变化,并对结果进行关联分析,以期探讨麻杏石甘汤治疗肺炎时对肠道菌群结构和代谢功能的分子基础和机制,中医以“麻杏石甘汤”为代表的相关方证理论提供实验科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    健康SPF雄性SD大鼠50只,3周龄,体质量(110±10)g,由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供,许可证号SCXK(京)2016-0002,饲养于北京中医药大学标准动物房。伦理批准号:bucm-4-2021090306-3125。

    1.2 主要试剂

    造模药物:LPS(Sigma,057M4013V)。

    中药复方麻杏石甘汤参考《方剂学》(人民卫生出版社),选用麻黄9 g、杏仁9 g、炙甘草6 g、生石膏18 g,制备麻杏石甘汤配方颗粒。配方颗粒够自北京中医药大学东方医院,由北京康仁堂药业有限公司生产。按人与大鼠0.018的等效剂量进行换算。

    对照药物:莫西沙星(拜耳,J20150015)、醋酸泼尼松(天津天药药业股份有限公司,CP190611a)。

    检测试剂盒:γ干扰素(interferon-γ,INF-γ),购自美国Immunoway公司,货号KE1431。丙二醛(malondialdehyde,MDA),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),一氧化氮(nitric oxide,NO),均购自南京建成生物工程研究所,货号分别为A003-1、A001-3、A013-2-1。

    1.3 分组与造模

    动物随机分为5组,正常组、模型组、中药组、抗生素组、激素组,每组10只。适应性饲养3天后,模型组、中药组、抗生素组和激素组予0.5 mg/mL的LPS雾化,每天30分钟,连续3天。中药组、激素组和抗生素组于第一次雾化结束后当天分别予麻杏石甘汤和莫西沙星、醋酸泼尼松口服治疗,每天灌胃1次,连续3天 ......