邱宇驰 韩红伟 张家玮 付伊萌

    肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是影响着全世界高达10%的人口的功能性胃肠道疾病[1]。在我国,主要以腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome with predominant diarrhea,IBS-D)亚型发病为主。针灸在防治IBS显现出独特的优势[2],整体调护且绿色安全。研究发现,IBS主要的发病机制之一是肠道低度黏膜炎性反应[3]。目前已有研究指出IBS模型大鼠结肠组织出现病理学改变[4-6]。研究证实电针可改善IBS-D体重增长率,亦可降低结肠黏膜组织炎性因子含量亦有一定的功用[7-8],但内在机制仍不明确。

    代谢组学技术属于系统生物学,能够将人作为一个整体,研究疾病的发生发展和治疗作用的内在机制,其分析思维与中医的整体思维极度相似。现已有研究者通过代谢组学技术分析IBS模型大鼠的粪便、肠道微生物从而探究中医药防治IBS的内在效应机制[9]。前期本团队的研究发现针灸能通过调节血清代谢物,影响代谢通路从而抑制炎症反应,发挥防治IBS的作用[10]。基于此,本实验将从结肠代谢模式为切入点,采用代谢组学技术,分析筛选结肠组织代谢物及其代谢途径,探究针灸抑制IBS肠道炎症反应的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及实验环境

    从三峡大学实验动物中心购进的SPF级3月龄雄性SD大鼠45只,体质量(300±20)g,许可证号:SCXK(鄂)2017-0012。在武汉体育学院饲养,SPF级环境条件控制为温度(22±2)℃、湿度(50±10)%,光照明/暗周期为12/12小时[11]。适应性喂养1周,期间自由饮食、饮水。动物实验伦理审核批准号:00287500。本研究所有动物实验流程严格按照国家科技部2006年发布的《关于做好实验动物实验操作工作的指导意见》执行。

    1.2 主要仪器与试剂

    戊巴比妥钠(Sigma),多聚甲醛(国药集团),异氟醚(阿拉丁),PBS溶液(ASPEN),一次性针灸针(0.30 mm×13mm,华佗牌),Rat TNF-α ELISA Kit (ELK Biotechnology,ELK1396),Rat IL-6 ELISA Kit(ELK Biotechnology,ELK1158),Rat IL-1β ELISA Kit(ELK Biotechnology,ELK1272),甲醇(Merck),乙腈(Merck),甲酸(Aladdin),二氯苯丙氨酸(BioBioPha/Sigma-Aldrich),苏木素(Sigma),伊红Y(水溶性)(国药集团),包埋石蜡(国药集团),中性树胶(国药集团) ......