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编号:1626213
“三法三穴”推拿手法干预早期对MinoCCI模型大鼠脊髓背角IL-17A/RA、C/EBPβ信号通路影响的研究
http://www.100md.com 2024年3月23日 环球中医药 2024年第3期
造模,批号,1材料与方法,1实验动物及分组,2主要仪器与试剂,3造模及干预方法,4取材及指标检测,5统计学分析,2结果,1各组大鼠PMWT结果,2各
     陈金平 刘志凤 于天源 王厚融 张英琦 杨震杰 萨出拉 官乾 徐亚静 张润龙 张汉钰 刘家玥 孙佳伟

    神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)是由于躯体感觉系统病变或者疾病导致的疼痛[1-2],其发病机制复杂,治疗效果欠佳,根据损伤部位可分为周围型神经病理性疼痛(peripherally-induced neuropathic pain,pNP)与中枢型神经病理性疼痛,其中pNP临床发病率较高[3]。脊髓背角作为第二级神经元,在pNP后对痛觉、温度觉信息的传导以及最终形成痛觉的过程中发挥着极其重要的作用[4]。

    推拿在pNP临床治疗中效果确切。课题组前期通过RNA-seq技术探究推拿镇痛相关机制,发现推拿长期及早期镇痛可能与白介素-17(interleukin-17)信号通路关系密切[5-6],pNP可引起IL-17信号表达异常。因此,对该通路中的关键指标白介素-17A(interleukin 17A,IL-17A)、白介素-17A受体(interleukin-17A receptor, IL-17RA)与转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(transcription factor CCAAT/enhancer binding protein β, C/EBPβ)进行研究。本研究建立轻度坐骨神经慢性压迫性损伤(Minor chronic compression injury of sciatic nerve, Minor CCI)模型大鼠,通过机械缩足反射阈值(paw mechanical withdraw threshold,PMWT)与冷敏阈值(cold sensitivity threshold, CST)观察干预1次后大鼠痛、温觉的恢复情况,并通过蛋白免疫印迹法(western bolt, WB)检测L4~6脊髓背角中IL-17A与C/BEPβ表达,通过荧光定量聚合酶链式反应(real time-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测IL-17A/RA与C/BEPβmRNA表达,对推拿早期镇痛启动机制进行探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    雄性SD大鼠24只,体质量(200±10)g,购买于斯贝福(北京)生物科技有限公司,许可证号SCXK(京)2019-0010,饲养于北京中医药大学屏障环境动物房[SYXK(京)2020-0033],3只/笼,环境温度为(25±1)℃,相对湿度(50±5)%,昼夜节律,大鼠自由进食,每周更换垫料2次 ......

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