王玉坤 孙适然 张津铖 程志强

    结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全球特别是亚洲地区消化系统高发肿瘤之一[1]。肝脏为CRC最常侵犯的脏器[2],结肠癌肝转移(colorectal cancer liver metastasis,CLM)是导致CRC高死亡率的重要因素,临床疗效尚不理想。微小RNA(microRNA,miRNA)被视为癌症治疗的新兴候选者。研究发现异位表达的MicroRNA-34a(miR-34a)能通过抑制CRC细胞增殖、迁移等途径干预CLM的进程[3]。目前对miR-34a及其下游靶基因在CLM上的基础研究较少。

    Notch1是肿瘤坏死因子超家族的成员,在结肠癌、乳腺癌等肿瘤组织中高表达;核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是Notch1的下游靶点,Notch1/NF-κB信号轴与CRC恶性潜能及CLM进展程度密切相关。笔者通过文献[4]及TargetScan分析证实miR-34a与Notch1的3’UTR高度同源配对,miR-34a能通过介导Notch1信号通路抑制乳腺癌细胞生长。那么,Notch1是否也是miR-34a在CLM中的潜在靶基因,亟待探索。

    CLM中医归属“积聚”“传舍”等范畴。文献及前期研究发现CLM患者的中医证型以脾气亏虚为主,临证治宜健脾益气[5-9]。中日友好医院院内制剂调脾安肠方以益气健脾为总法,兼具化湿解毒、疏肝养血之功,临床疗效确切,但作用机制尚不明晰。本研究拟通过构建脾脏注射结肠癌HCT-116细胞法构建裸鼠CLM模型,观察使用调脾安肠方前后裸鼠肝病理组织中miR-34a-5p、Notch1/NF-κB信号轴的表达变化,探讨调脾安肠方防治CLM的可能分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及实验环境

    SPF级雄性Balb-c裸鼠30只,5～6周龄,体质量(20±5)g,购自斯贝福(北京)生物技术有限公司(动物合格证号:NO.110324221100912737)。动物于中日友好临床研究所无特殊病菌的SPF级环境饲养[许可证号:SYXK(京)2010-0011],室温(20±2)℃,相对湿度为(65±5)%,自然光暗周期,正常饮食。动物实验遵照《中华人民共和国实验动物管理条例》,并通过中日友好医院伦理委员会审查批准(zryhyy61-21-03-54)。

    1.2 实验药物

    调脾安肠方药物组成:黄芪15 g、党参10 g、茯苓10 g、生薏米10 g、炒山药10 g、莲子肉10 g、砂仁6 g、佛手10 g、香橼10 g、马齿苋10 g、炒白扁豆10 g、炒山楂10 g、枸杞子10 g、黄精10 g、沙棘6 g、炒鸡内金10 g、炙甘草6 g、大枣5 g ......