王倩影 杨晨 钟卓泰 张涛 姚梦茜 王琳 张格知 班彦然 苏晓兰 魏玮

    溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)以非特异性肠道炎症为病变特点[1],主要表现为腹泻、黏液脓血便和腹痛,病变范围主要局限于结肠及直肠黏膜,是一种难治性、易复发的消化系统疾病。

    UC是肠道肿瘤发生的重要危险因素之一[2],有报道称,UC患者的结直肠癌风险比普通人高3～5倍[3],而且病程越长,癌变机率越高[4]。尽管治疗UC的药物日新月异,包括用于诱导和维持UC缓解的5-氨基水杨酸(5-amino salicylic acid,5-ASA)药物、皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂等,但无法维持这种疾病的缓解和避免复发,在临床上仍是一个难以解决的问题。保护肠道免受有害物质入侵的第一道屏障——肠黏膜屏障,当肠道上皮细胞受到破坏,黏液层的组成出现缺陷时,就会导致肠道屏障的破坏,从而促使肠道炎症产生[5]。因此,维护肠道黏膜屏障功能完整,提高黏膜修复能力是预防和维持UC患者病情稳定的重要环节。

    中医药治疗UC强调的是系统化的认识和个体化的治疗,且中药具有多成分,多环节,多靶点优势,能够起到诱导缓解、预防病情复发、延长复发时间、稳定患者病情的作用。清热化湿调枢方为魏玮教授传承国医大师路志正先生学术思想的基础上,根据三十余年临床经验及对UC病因病机的认识,化裁乌梅丸、葛根芩连汤等经典名方而来,方中以乌梅、败酱草、白芍、白术、太子参、茯苓、木香、黄连、秦皮等药为主,功专清热化湿,健脾调枢,临床研究显示清热化湿调枢方治疗溃疡性结肠炎临床疗效突出[6]。前期课题组的动物实验表明,清热化湿调枢方对DSS结肠炎小鼠的肠道黏膜屏障损伤有修复作用,但尚不清楚清热化湿调枢方在预防和延缓UC发作方面,能否保持肠道屏障功能稳定。本研究将基于肠道黏膜组织中粘蛋白2(mucoprotein-2,MUC-2)、闭合蛋白2(Claudin-2)表达变化,通过建立葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的UC小鼠模型,探讨清热化湿调枢方在预防和缓解DSS结肠炎模型小鼠肠黏膜屏障功能损伤方面可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    购买于北京斯贝福生物技术有限公司的SPF级C57BL/6小鼠24只,雄性,8周龄,体质量(20±2)g,实验动物许可证号:SCXK(京)2015-0015。在中国中医科学院针灸所SPF级兽舍饲养实验鼠,在室温(24±2)℃、相对湿度35%～45%的通风隔音笼舍内,每隔12小时进行一次光照与黑暗交替饲养 ......