张超

    横纹肌溶解症(RM)是指因挤压、运动、药物等原因所致横纹肌破坏和崩解，引起内环境紊乱、急性肾损伤(AKI)等组织器官损害的临床综合征[1]。AKI是横纹肌溶解的严重并发症，主要表现为肾功能异常和尿量减少，水电解质及酸碱平衡紊乱加重，其致病机制包括肾缺血再灌注、肌红蛋白的直接毒性和管型形成等。RM致AKI发病率较高，目前治疗方法主要有补液、纠正电解质紊乱和血液透析等，缺乏足够的药物治疗手段。

    c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路是丝裂酶原活化蛋白激酶信号(MAPKs)转导通路家族的成员之一，参与多种肾脏疾病。在AKI方面，研究表明JNK信号通路在缺血再灌注、顺铂致AKI等模型中被激活并加重损伤，使用JNK抑制剂可起到肾保护作用[2-3]，但JNK在RM致AKI方面的作用尚未见报道。桦木酸(BA)属于羽扇豆烷型五环三萜类物质，广泛分布于桦木科植物中。中国传统医学中，桦树皮可用于黄疽、乳痈、疥疮等疾病的治疗[4]。现代医学研究证明，桦木酸在缺血和脓毒症引起的肾脏损伤中具有治疗作用[5-6]，对RM致AKI可能也有治疗作用，但具体效果和机制需要实验证明。

    本研究采用甘油肌注法建立大鼠RM致AKI模型，探讨损伤后肾脏JNK通路的变化，以及桦木酸的干预效应，为深入认识RM致AKI的发病机制及探索新的治疗靶点提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物和材料 选取清洁级健康成年雄性Wistar大鼠32只，体质量190～210 g，8周龄，均购自河北医科大学实验动物中心。所有大鼠饲养环境为在空调室中，12 h明暗循环，温度(22±2)℃和相对湿度(50%～60%)保持恒定，所有动物实验符合实验动物福利伦理原则。

    主要试剂为桦木酸(西安昊轩提供)、JNK通路拮抗剂SP600125(美国Sigma提供)、兔抗鼠p-JNK多克隆抗体(美国CST提供)、兔抗鼠JNK多克隆抗体(美国CST提供)、兔抗鼠Cleaved Caspase-3多克隆抗体(美国CST提供)、兔抗鼠NF-κB多克隆抗体(美国CST提供)、检测IL-1β的ELISA试剂盒(美国Sigma提供)、过氧化物酶标记的羊抗兔二抗(美国KPL提供)、BCA检测试剂盒(上海生工提供) ......