杨杰，李兰林

    万古霉素(vancomycin)是一种三环糖肽类抗生素，对革兰阳性球菌抗菌作用强，特别是目前临床上较棘手的严重耐药金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌所致的感染有较好的疗效[1]。万古霉素于1958年被批准用于临床，因其在严重感染中具有重要地位，因此，万古霉素曾被誉为“人类对付难治性耐药菌株的最后一道防线”，通常在其他抗菌药物无效时才应用[2]。其主要的给药方式是静脉给药，90%以上由肾脏排泄，万古霉素的抑菌机制之一是通过其七肽骨架与细菌细胞壁糖蛋白合成启动子——胞壁酰五肽的末端二肽片段D-Ala-D-Lac形成5个氢键抑制细菌细胞壁的生长，导致细胞凋亡[3]。随着万古霉素的大量使用，不良反应时有发生。万古霉素服用量较大，肾功能不全或老年患者更易发生耳肾毒性，因此，需要通过监测万古霉素的血药浓度实现个体化给药方案，提高MRSA等革兰阳性球菌感染的治愈率,减少药物不良反应[4-5]。

    目前国内外对万古霉素的血药浓度监测多采用免疫检测法、微生物法及高效液相色谱法(HPLC)等。免疫检测法试剂盒较昂贵，需集中标本后检测，专属性较差，测量结果偏高，且FPID购置仪器费用较高，受专用试剂供应限制，因此，限制了其在临床应用[6-7]。微生物检测法是利用抗菌药物在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以检测供试品效价的一种测试方法。微生物法因步骤繁琐、耗时长而较少使用[8]。HPLC测定万古霉素血药浓度多采用内标法，但内标法操作步骤较繁琐，同时由于内标物的不稳定性，检测过程中需不断地配制内标。本实验通过建立了一种外标法定量测定血清中万古霉素浓度的HPLC，该法简便、准确、快速，适用于万古霉素血药浓度的监测和药动学研究。现报道如下。

    1 实验材料

    1.1 试剂 乙腈(色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司生产，批号：20140101)；磷酸二氢钾(分析纯 ......