于晓斌,张先辉

    胃癌是常见的癌症之一[1]。研究表明,miRNA具有干预肿瘤发生发展的功能,可作为监测癌症的生物标志物[2-3]。研究证实,miRNA能够调控下游靶基因,从而在胃癌中发挥致癌或抑癌作用[4]。miR-181a是STAT3介导的TCRαβ+CD8+T淋巴细胞白血病生存网络中的新参与者[5]。miR-181a可作为治疗靶点和肿瘤标志物。靶向致癌miR-181a-2-3p可抑制胃癌的生长并降低顺铂耐药性[6]。远华蟾毒精是中国传统药物蟾酥的活性化合物,具有抗肿瘤作用。远华蟾毒精通过抑制JAK2/STAT3信号传导发挥抗肿瘤作用[7-8]。可见,远华蟾毒精可能通过干预miR-181a表达影响胃癌发生发展过程。本研究旨在分析远华蟾毒精通过下调miR-181a抑制胃癌细胞生长及侵袭,为胃癌的临床治疗提供理论依据。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 2019年1月—2020年12月滨州医学院附属医院诊治胃癌患者90例,取其胃部病变标本及血液备用;另纳入30例癌旁组织样本备用。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养及药物干预:本实验中使用的胃癌细胞系SGC-7901购自ATCC公司。细胞用含胎牛血清(10%)的DMEM培养基(Gibco,USA)在37 ℃、5% CO2、湿度95%的培养箱内进行培养。收集处于对数期胃癌细胞SGC-7901,制成4×104个/ml细胞悬液,100 μl接种于96孔细胞培养板中,置于37 ℃、5% CO2培养箱中过夜培养。设置对照组与远华蟾毒精组,每组3个复孔。远华蟾毒精组每孔加175 μl浓度分别为0.05、0.10、0.50、1.00、1.25 μg/ml的远华蟾毒精,对照组不加药。

    1.2.2 RT-qPCR检测miR-181a表达水平:使用TRIzol提取总RNA。TaqMan MicroRNA反转录试剂盒(美国Life Technologies)将总RNA反转录为特定microRNA的cDNA ......