曹雯,莫凯,潘金凤,韦斯军,王振宁,尹园

    肝癌是世界上癌症相关发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一,尽管目前有许多化疗方法可用于肝癌的治疗,但其在发挥抗肿瘤作用同时会对机体产生一定的毒性作用[1]。迷迭香酸是一种天然多酚类化合物,是迷迭香、肿节风等中药的有效活性成分,具有抗炎、抗氧化、调节免疫等多种药理学活性[2]。近年研究表明,迷迭香酸在乳腺癌、结直肠癌、肝癌等疾病中能发挥良好抗肿瘤作用[3-5]。本研究通过建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,观察迷迭香酸对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及其对肿瘤免疫微环境的影响。

    1 实验对象、试药与仪器

    1.1 实验动物及细胞 昆明小鼠,雄性,6～8周龄,体质量(20±2)g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司(动物许可证号:SCXK-2019-0004)。动物饲养环境温度(25±2)℃,湿度40%～70%,在12 h黑暗/12 h光照同期动物设施中适应性喂养1周后开始实验。动物实验经广西中医药大学实验动物福利伦理委员会批准(批准号SYXK-2019-0001)。小鼠H22肝癌腹水细胞购自上海吉凯基因医学科技股份有限公司。

    1.2 药物与试剂 迷迭香酸(纯度>97%,上海麦克林生化科技有限公司,批号C11552095);注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司,批号21102825);流式凋亡试剂盒(碧云天生物技术有限公司,批号C1062);小鼠CD3e APC-Cy7抗体(批号557596)、CD4 APC抗体(批号553051)、CD8a PerCP-Cy5.5抗体(批号551162)均购自BD Pharmingen公司;小鼠干扰素-γ(IFN-γ)(批号20220910)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(批号20220910)、白介素-10(IL-10)(批号20221010)ELISA试剂盒均购自Bioswamp公司 ......