王静,王彤,刘航,苏天宏,崔瑞琴

    雷公藤最早记载于《神农本草经》,味苦辛,性寒,入肝、脾二经,有大毒,可祛风湿、活血通络、清热解毒、消肿止痛[1]。雷公藤多苷是从植物雷公藤根心部提取的一种混合物,被广泛应用于炎性反应性疾病、自身免疫性疾病、器官移植及肿瘤的治疗。雷公藤甲素(TP)是目前公认的雷公藤多苷的主要药效成分,具有抗炎、免疫抑制、抗增殖、促凋亡等多种药理作用[2-3];但是,因其具有较强的药物毒性,包括引发器质性损害和严重的功能障碍,甚至死亡,导致其在临床应用中严重受限[4]。因此,如何才能在保持TP生物活性且不影响疗效的基础上来降低或者消除TP的毒性作用是该领域亟待解决的关键性科学问题。监测TP的体内代谢是提高临床用药安全性的重要手段之一。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 8周龄SPF级SD雄性大鼠24只(宁夏医科大学实验动物中心提供),体质量200～220 g[许可证号:SCXK(宁)2020-0001]。所有大鼠均在温度(22±2)℃、相对湿度50%～60%、12 h明暗交替的环境下饲养,自由进食、饮水。

    1.2 药品与试剂 TP标准品(货号B20709,HPLC≥98%)购自上海源叶生物科技有限公司;内标泼尼松龙标准品(货号P829930,纯度:98%)购自上海麦克林生化科技有限公司;利福平胶囊(国药准字H51020786)购自成都锦华药业有限责任公司;琥乙红霉素片(国药准字H61022359)购自西安利君制药有限责任公司;雷公藤多苷片(国药准字Z32021007)购自江苏美通制药有限公司。羧甲基纤维素钠(CMC-Na)购自天津凯通化学试剂有限公司;乙酸乙酯购自德国Eppendorf公司;乙腈、甲醇(色谱醇)、甲酸购自美国millipore公司;乙酸铵购自美国Sigma公司。

    1.3 主要仪器 QTRAP5500质谱仪(美国AB SCIEX公司)、Nexera X2 LC-30AD超高压液相色谱仪(日本Shimadzu公司)、Waters XBrige C18column色谱柱(美国Waters公司)、Bioruptor超声波系统(比利时Diagenode公司)、5430R冷冻离心机(德国Eppendorf Centrifuge公司)等 ......