黄 朔 ，李明振 ，张洪波 ，何其勇 ，姜 珊 ，金 琦

    (1.佳木斯大学附属第一医院外科，黑龙江佳木斯 154002；2.佳木斯大学附属第一医院内科，黑龙江佳木斯 154002；3.佳木斯大学经济管理学院，黑龙江佳木斯 154003)

    丹参对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用机制的研究

    黄 朔1，李明振1，张洪波1，何其勇1，姜 珊3，金 琦2*

    (1.佳木斯大学附属第一医院外科，黑龙江佳木斯 154002；2.佳木斯大学附属第一医院内科，黑龙江佳木斯 154002；3.佳木斯大学经济管理学院，黑龙江佳木斯 154003)

    目的：探讨丹参对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠随机分为4组，假手术组，模型组(肾脏缺血再灌注损伤)，治疗1组(肾脏缺血再灌注损伤前24 h给予药物)，治疗2组(肾脏缺血再灌注损伤后12 h给予药物)。双侧肾动脉夹闭22 min，制作动物模型；比色法测定血清肌酐和血清尿素氮；Western blotting检测肾脏组织中，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)的蛋白表达；TUNEL法检测肾脏上皮细胞凋亡。结果：模型组与假手术组比较，大鼠肾脏功能明显减退(P0.05)。结论：再灌注前给予丹参，能够抑制肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾脏上皮细胞凋亡，对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。

    缺血再灌注损伤；肾脏；凋亡

    当前，多数学者认为，肾脏缺血再灌注损伤时，肾脏的上皮细胞会出现细胞凋亡，而细胞凋亡的主要途径为，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶依赖途径和非依赖途径两种[4]。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶依赖途径在肾脏的上皮细胞凋亡中发挥主要作用，在细胞凋亡中，会伴随caspase蛋白质家族的激活[5]。本研究着眼于丹参，作为一种传统中医药，对肾脏缺血再灌注大鼠的肾脏上皮细胞凋亡和肾脏组织caspase-3蛋白质表达的影响，探讨丹参对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用，为临床上防治肾脏缺血再灌注损伤提供新的方法和思路。

    1 材料与方法

    1.1 动物与试剂

    健康雄性Wistar大鼠20只，年龄6～8周，重量(180±20)g，12/24昼夜周期睡眠，由佳木斯大学实验动物中心提供(黑动字第99102001号，SPA方式饲养)。本实验应用的动物实验方法，获得了佳木斯大学附属第一医院医学伦理委员会的许可。

    血清尿素氮和血清肌酐试剂盒，采购自中生北控生物科技股份有限公司。丹参注射液购自正大青春宝药业有限公司；caspase-3多克隆抗体(兔抗大鼠)购自美国GeneTex公司；β-actin多克隆抗体(兔抗大鼠)及羊抗兔二抗 ......