杜君好，刘 磊，王贵怀

    (1.河南省商丘市第一人民医院神经外科二病区，河南商丘 477100；2.北京垂杨柳医院脑外科，北京 100022；3.首都医科大学附属北京天坛医院神经外科三病区，北京 100050)

    基因治疗脊髓损伤中Ad(腺病毒)-NGF(神经生长因子)的应用研究

    杜君好1，刘 磊2，王贵怀3

    (1.河南省商丘市第一人民医院神经外科二病区，河南商丘 477100；2.北京垂杨柳医院脑外科，北京 100022；3.首都医科大学附属北京天坛医院神经外科三病区，北京 100050)

    目的：应用Ad-NGF转染成纤维细胞治疗脊髓半切模型大鼠探讨在基因治疗脊髓损伤中腺病毒作为载体介导的NGF对脊髓损伤的治疗价值。方法：主要材料为Ad-NGF，293细胞，成纤维细胞，大鼠等。成纤维细胞与Ad-NGF悬液混合培养，将细胞注射至脊髓半横切损伤模型大鼠局部。结果：NGF因子在体外实验组可检测到。Ad-NGF转染组单位面积上神经轴突数量比对照组多。结论：NGF因子在体外实验组得到表达，体内修饰组有NGF表达。证实Ad-NGF转染成纤维细胞通过促进脊髓损伤大鼠神经轴突的生长促进损伤神经功能的恢复。

    腺病毒-神经生长因子；成纤维细胞；转染；脊髓损伤

    我国脊髓损伤发病呈明显上升趋势，给社会带来的问题非常严重，脊髓损伤的治疗一直是未能解决的难题[1-2]。在疾病的基因治疗中经常用腺病毒[3-5]作为靶基因的载体，而神经生长因子[6](NGF)是最早被发现的一种神经营养因子，用组织细胞培养手段已经证实NGF对神经元具有营养作用[7-8]，本实验将二者结合，对脊髓损伤的Ad-NGF基因治疗进行一次有益的尝试，希望能为脊髓损伤患者找到一种有效的方法。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂及器材

    Ad-NGF悬液由北京大学医学部生理与病生理学系提供；HDFa购自Cascade Biologics公司；4℃低温冷冻冰箱(Sanyo公司)；数码照相机(COOLPIX4500 ......